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- 2020-03-17 发布于山东
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第四章 基因诊断技术与方法(上)
基因诊断技术与方法
基因诊断技术主要分为 分子杂交技术、聚合酶链反应、DNA测序技术、荧光原位杂交、生物芯片、免疫组织化学技术和其他基因诊断技术。以下我们分别详细介绍。
1 分子杂交技术
1.1 分子杂交技术的定义
两个分子之间由于化学上的作用,通过化学键结合在一起称为分子杂交。在生物学上,人们利用这一原理,在将已知分子制备成带一定可被检测的标记(如同位素)的条件下,来检测另一分子的存在与否及含量多少等等,称为分子杂交技术。 被标记的分子称为探针(probe),被检测的分子称为标点(target)。利用一条(寡)核苷酸链探针,可实现对另一种核苷酸链的检测,包括DNA-RNA、DNA-DNA、RNA-RNA、抗原与抗体间的分子杂交,蛋白质与DNA之间的分子杂交等等。这些都是基因及其产物分析中的常用方法
1.2 分子杂交技术的历史
Hall等于1961年创立:分离某些标的核酸分子
1962年Bolton等创立了固相核酸杂交 (solid phase hybridization)
1968年Britten等开始了DNA-DNA杂交的动力学研究
1972年Aviv利用多聚U-Sepharose和寡聚dT -纤维素(cellulose)从总RNA中分离含有多聚A的mR
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