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在选择菌种来源时，存在一些选择方法。 例②： 欲筛选 Amylases 菌种，则最好在发霉的淀 粉材料上筛选，如在 Potato 、 Corn 、 Starch 等例①： 欲筛选纤维素酶菌种，则须在木质纤维素的 材料上选择，如在稻草、麦杆等； 而在选择降解烟草纤维素的菌种，则最好在 烟草（如烟叶、烟杆上），即发霉的烟叶、烟 草储存场地采样（烟叶中含尼古丁）。 第 31 页 / 共 62 页 ? 例 ③ ： 在一些极端环境中，如高温、高压、高盐、 高 pH 、低 pH 以及海洋中，存在着大量适应了 各种环境压力的微生物类群，都是尚待开发的 重要资源。对这类微生物已经有一些成功筛选 的例子。 表 2.2 极端环境放线菌产生的次生代谢产物 第 32 页 / 共 62 页 ? 例④： 在腐败的动物、植物遗体或身体中分离菌 株： 死亡虫体的肠道中有苏云金芽孢杆菌； 从根瘤中分离出放线菌； 从白蚁肠道分离出类似放线菌的细菌。 第 33 页 / 共 62 页 二、材料的预处理 在分离之前，含微生物材料的标本首先进行预 处理，可大大提高菌种分离的效率。 （一）物理方法分离 Kyrilowicz （ 1976 ）曾估计由放线菌（纲）产生 的 1530 种抗生素中有 1467 种是源自链霉菌属。为 此以 100℃ ， 1h ；或 40℃ ， 2--6h 处理土壤，可以 有效得分离出链霉菌属的菌种。 采用热处理，可以减少材料中的细菌数量，达到 浓缩作用。 这可能是因为放线菌的孢子比细菌细胞 （尤其是 G - 菌细胞）更耐热。 例 1 ：本科生以往筛选放线菌的失败： 因放线菌生长较慢，所以要求高温处理土壤，减 少细菌等杂菌，富集放线菌。 例 2 ：茅台酒的“高温堆集“工艺也是利用这一原 理浓缩高温细菌（产淀粉糖化酶的嗜热芽孢杆菌）。 第 34 页 / 共 62 页 （二）化学方法： ? 在筛选土壤中的放线菌时，将去莠津（ atrazine ）加入 土样中会导致放线菌群数量的增加； ? 在杀真菌剂（ carboxanilide ）存在下，诺卡氏菌属的 菌更容易分离到。 （三）诱饵技术： ? 诱饵技术是将固体基质（如花粉、头发、石蜡棒或蛇皮 等）加到待检土壤或水中，待真菌长成后再倒平板。具 体说，即在分离前添加一些固体基质在土壤或水样中； 或洒些可溶性养分来强化培养。 ? 近来，用花粉诱饵从土壤中分离出 13 株小瓶菌，其中有 些新种或亚种。 第 35 页 / 共 62 页 表 2.3 含微生物材料的标本预处理方法 第 36 页 / 共 62 页 三、所需菌种的分离 ? 在自然界获得的标本，是很多种类微生物的混杂物，一 般采用平板划线法或平板稀释法进行纯种分离。 ? 但大多数采集的样品中，所需微生物并不一定是优势菌 或数量有限。为了增加分离成功率，可通过富集培养增 加待分离菌的数量。 ? 主要是利用不同种类的微生物其生长繁殖对环境和营养 的要求不同，如温度、 pH 、渗透压、氧气、碳源、氮源 等，人为控制这些条件，使之有利于某类或某种微生物 生长，而不利于其他种类微生物的生存，以达到使目的 菌种占优势，而得以快速分离纯化的目的。这种方法又 被称为 施加选择性压力分离法 。 第 37 页 / 共 62 页 图 2.1 分离细菌的示意图 第 38 页 / 共 62 页 第七章 微生物的遗传变异和育种 表 2.4 用于选择性分离放线菌的几种培养基 第 39 页 / 共 62 页 第七章 微生物的遗传变异和育种 表 2.5 分离不同微生物时常用的抗生素或试剂 第 40 页 / 共 62 页 【影响分离效率的因素】 分离的效率取决于培养基的养分， pH 和加入的选择 性抑制剂。 ? ① 培养基 分离降解纤维素的菌株（尤其是霉菌，如绿色木霉），往往 是在无机盐 + 纤维素的培养基中，但考虑到没有游离的单糖 和 N- 源生长得很缓慢，故在培养基中加入少量蛋白胨 （ ≤ 0.1% 蛋白胨）让菌株限量生长。 ? ② pH 分离产抗生素的放线菌，其 pH 常在 6.7--7.5 之间（因为放线 菌均为嗜中性，略为偏碱性）。但如果要分离嗜酸性放线