基因调控乳糖操纵子.pptVIP

如何考察基因调控在基因表 达系统中的重要作用 乳糖操纵子 乳糖操纵子的提出背景 试验现象 ： 大肠杆菌在含有葡萄糖的培养基中生 长良好，在只含乳糖的培养基中开始时 生长不好，但过段时间大肠杆菌才开始 生长。 一 操纵子学说 1 操纵子模型的提出 1961 年， Monod 和 Jacob 提出并获得 1965 年诺贝尔生理学或医学奖 2 操纵子的定义 操纵子：是基因表达的协调单位， 由启动子、操纵基因及所控制的一组功 能上相关的结构基因所组成。 操纵基因受调节基因产物的控制。 乳糖操纵子 (lac operon) ? Z 编码 β - 半乳糖苷酶：将乳糖水解成葡萄糖和 半乳糖 ? Y 编码 β - 半乳糖苷透过酶：使外界的 β - 半乳糖苷 （如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜 进入细胞内。 ? A 编码 β - 半乳糖苷乙酰基转移酶：乙酰辅酶 A 上 的乙酰基转到 β - 半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。 二 酶的诱导 — lac 体系受调控的证 据 三 乳糖操纵子调控模型 主要内容： 1 Z 、 Y 、 A 基因的产物 由同一条多顺反子的 mRNA 分子所编码。 2 这个 mRNA 分子的启动子紧接着 O 区， 而位于 I 与 O 之间的启动子区 (P), 不能单独启动合 成 β - 半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。 3 操纵子基因是 DNA 上的一小段序 列（仅为 26bp ） , 是阻遏物的结合位点。 操纵位点的回文序列 4 当阻遏物与操纵基因结合时， lac mRNA 的转录起始受到抑制 5 诱导物通过与阻遏物结合，改变 它的三维构像，使之不能与操纵基因结 合，从而激发 lac mRNA 的合成。当有诱 导物存在时，操纵基因区没有被阻遏物 占据，所以启动子能够顺利起始 mRNA 的合成。 四 影响因子 1 lac 操纵子的本底水平表达 有两个矛盾是操纵子理论所不能解释的： ? 诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结 合，而转运诱导物需要透过酶，后者的合成有 需要诱导。 解释： 一些诱导物可以再透过酶不存在时进入细 胞。一些透过酶可以在没有诱导物的情况下合 成。 ? 真正的诱导物是异构乳糖形成的， 因此，需要有 β - 半乳糖苷酶的预先存在。 解释： 本底水平的组成型合成：非诱导状 态下有少量的 lac mRNA 合成。 2 大肠杆菌对乳糖的反应 培养基：甘油 按照 lac 操纵子本底水平的表达，每个细胞内有 几个分子的 β - 半乳糖苷酶和 β - 半乳糖苷透过酶。 培养基：加入乳糖 少量乳糖在透过酶作用下进入细胞，通过 β - 半乳糖苷 酶形成异构乳糖，诱导物诱导 lac mRNA 的生物合成， 这样大量乳糖进入细胞内，其中多数被降解为葡萄 糖和半乳糖（碳源和能源），少数形成异构乳糖。 →