肝纤维化形成过程中ROS及GSH的浓度变化.pdf

目 录 中文摘要I 英文摘要Ⅲ 常见缩写词中英文对照表Ⅴ 正 文1 前言1 材料方法3 结果8 讨论10 结论12 参考文献13 附图15 综述16 致 谢25 在校期间研究成果26 个人简历27 山西医科大学硕士学位论文 肝纤维化形成过程中血清GSH、ROS浓度变化 摘 要 目的： 肝纤维化是由各种急慢性肝损伤引起的一种动态病理状态，是由炎症引起肝星 状细胞 （HSCs）活化，导致细胞外基质(ECM)过度积聚所致。目前认为氧化应激是 众多慢性肝脏疾病共同的发病机制，而氧化应激其实就是ROS产生过多而抗氧化防 御系统能力下降，使氧化与抗氧化之间的不平衡，因此，本研究研究大鼠肝纤维化 过程中血清中活性氧簇 （ROS）和还原性谷胱甘肽 （GSH）的水平变化及其相互关系， 以及研究正常人与慢性乙肝肝硬化患者血清中ROS及GSH 的水平，探讨ROS和GSH 在肝纤维化形成中的作用，为临床早期治疗肝纤维化提供新的方案。 方法： 1. 动物实验：饲养34只6周龄健康雄性清洁型大鼠。随机分为两组：对照组 6只和模型组28只，模型组大鼠给予皮下注射40%CCL 油剂，第一次给予模型组大 4 鼠注射剂量为5ml/kg，随后量减少为2ml/kg，1周2次。对照组大鼠给予相同剂量 的油剂皮下注射，模型组在注射CCL 后的第2、4、6、8周各杀死大鼠6只，对照 4 组在8周时杀死6只大鼠，留取同一位置的肝组织制作病理切片行常规HE 以及 Masson染色，随后置于显微镜下观察的其病理改变；同时留取血清采用酶联免疫法 分别测定各组血清中的ROS浓度、比色法测定GSH 的浓度。 2. 临床实验：收集正常健康对照组及乙肝肝硬化组血清标本各20例，采用酶 联免疫法分别测定各组血清中的ROS浓度、比色法测定GSH 的浓度。 结果： （1）大鼠肝组织的病理表现：正常对照组肝组织切片显示肝细胞索排列整齐， 肝组织结构正常，未见明显异常病理变化；模型组8周时肝切组织片显示肝小叶结 构扭曲，在门脉和门脉中央间隔之间形成完整和不完整的小叶间隔，充血的血管周 I 山西医科大学硕士学位论文 围炎症细胞浸润，从而形成再生结节，形成了假小叶，造模成功。 （2）随着肝纤 维化模型的建立，模型组2、4、6、8周ROS水平依次为1.84±0.69、1.72±0.65、 2.48±1.14、1.82±0.46均较对照组 （1.56±0.84）升高，差异具有统计学意义 （P 值分别为0.000、0.000、0.010、0.000，均小于0.05）；GSH水平为：18.39±6.86、 17.17±6.50、24.80±11.44、18.22±4.58均较对照组 （15.58±8.42）升高，但 差异无统计学意义(P值分别是0.525、0.712、0.38、0.54；均大于0.05）； （3） 临床收集标本结果示：肝硬化患者的血清ROS浓度 （90.32±56.74）明显高于正常 健康对照组 （55.01±40.09），差异有统计学意义 （P＜0.05）；肝硬化患者的血 清GSH浓度 （0.577±0.233）高于健康对照组 （0.425±0.107），但差异无明显统 计学意义 （P0.05）。 （4）Pearson 相关性分析：在实验大鼠肝纤维化形成过程中 ROS与GSH 的水平存在正相关，差异有统计学意义 （r分别为0.81、P值＜0.05）。 结论： 1. 模型组大鼠血清GSH、ROS水平均高于正常组，GSH 的浓度与ROS浓度呈正 相关，可能参与肝纤维化的发生发展。 2. 慢性肝硬化患者中血清ROS、GSH浓度高于健康正常者。 关键词：肝纤维化；肝硬化；活性氧簇；还原性谷胱甘肽。