萝卜种质和杂交种纯度鉴定的分子标记筛选.pdfVIP

符号说明 英文缩写 英文名称 中文名称 ℃ centigrade degree 摄氏度 g gram 克 ml milliliter 毫升 mmol millimole 毫摩尔 μmol micromole 微摩尔 μl microlitre 微升 l liter 升 PIC polymorphic information content 评价标记多态性信息量 unweighted pair-group method with UPGMA 算术平均非加权配组法 arithmetic mean 目录 中文摘要 I Abstract II 1 前言1 1.1 分子标记的意义1 1.2 分子标记技术的种类2 1.2.1 限制性内切酶片段长度多态性（RFLP ）2 1.2.2 简单重复序列（SSR）2 1.2.3 相关序列扩增多态性（SRAP ）3 1.2.4 随机扩增多态性DNA 技术（RAPD ）3 1.2.5 插入缺失标记（InDel ）3 1.3 分子标记在杂交种纯度鉴定中的应用3 1.4 分子标记在构建指纹图谱中的应用4 1.4.1 指纹图谱的研究概况4 1.4.2 指纹图谱在萝卜育种中的应用6 1.5 本研究的目的及意义6 2 萝卜种质的遗传多样性分析和核心分子标记筛选8 2.1 试验材料8 2.1.1 供试材料8 2.1.2 引物10 2.2 试验方法13 2.2.1 取样13 2.2.2 DNA 提取14 2.2.3 PCR 扩增14 2.2.4 PAGE 凝胶电泳检测14 2.2.5 数据统计15 2.3 结果与分析16 2.3.1 InDel 和SSR 引物的初步筛选16 2.3.2 不同萝卜种质的遗传多样性分析20 2.3.3 萝卜种质的核心分子标记筛选24 引物扩增条带赋值24 核心引物的筛选和指纹图谱构建26 构建110 份萝卜种质的身份证编码29 2.4 讨论32 3 萝卜田间杂交种纯度鉴定的分子标记筛选34 3.1 试验材料34 3.1.1 引物34 3.1.2 F 杂交材料的田间样品35 1 3.2 试验方法36 3.2.1 提取杂交材料DNA 36 3.2.2 PCR 扩增36 3.2.3 PAGE 凝胶电泳检测36 3.3 结果与分析37 3.3.1 引物在亲本中的扩增结果37 3.3.2 F1 杂交材料的纯度鉴定38 3.4 讨论39 4 结论41 参考文献42 附录47 致谢67 山东农业大学硕士专业学位论文 中文摘要 我国作为萝卜的起源地之一，有着丰富的种质资源，了解这些资源的亲缘关系可 以有效地指导育种工作。利用分子标记分析，可以快速、可靠地分析种质间的亲缘关 系，在此基础上，还能构建种质资源的分子标记指纹图谱辅助开展品种保护工作。此 外，随着生活水平的提高，人们对于蔬菜品质和外观的整齐一致也有了更高的要求， 蔬菜种子的纯度越来越受到重视。传统育种方法生产的杂交种通常需试