《发酵工程》第7章发酵工艺控制(1引言-2发酵过程原理).ppt

7.2.2 补料分批发酵 7.2.2.1 补料－分批发酵理论基础 补料分批发酵定义：在分批发酵过程中补人新鲜的料液，以克服由于养分的不足，导致发酵过早结束。 由于只有料液的输入，没有输出，因此，发酵液的体积在增加。 若分批培养中的细胞生长受一种基质浓度的限制，则在任一时间的菌体浓度可用式(7—12)表示 若 St＝0，则其最终菌浓度为Xmax，和只要X0Xmax， 如果当Xt＝Xmax时开始补料，其稀释速率μmax，实际上当基质一进入培养液中很快便被耗竭，故得： F：补料流速； XT：总的菌量，XT＝XtV，其中V是在t时的罐的体积。 式(7—14)说明输入的基质等于细胞消耗的基质。故dS/dt=0，虽培养液中的总菌量XT随时间的延长而增加，但细胞浓度Xt并未提高，即dX/dt=0，因此μ=D。这种情况称为准稳态。 随时间的延长，稀释速率将随体积的增加而减少，D可用式(7—15)表达 0 ) ( F/ D F V t + = 7－15 V0：原来的体积。 因此，按Monod方程，残留的基质应随D的减小而减小，导致细胞浓度的增加。但在μ的分批补料操作中S0将远大于KS，因此，在所有实际操作中残留基质浓度的变化非常小，可当作是零。故只要D μmax和KSS0便可达到准稳态，如图7—5所示。 恒化器的稳态和补料-分批发酵的准稳态的主要区别在于恒化器的μ是不变的，而补料-分批发酵的μ是降低的。 补料-分批发酵的优点： 、能在补料-分批发酵系统中维持很低的基质浓度，从而避免快速利用碳源的阻遏效应 、能够按设备的通气能力去维持适当的发酵条件 、能减缓代谢有害物的不利影响。 图7—5 补料-分批发酵的准稳态 为了获得最大的产率，需优化补料的策略。 通过描述比生长速率μ与比生产速率之间的关系的数学模型，藉最大原理(maximum principle)可容易获得比生长速率的最佳方案。这可以从实际分批-补料培养中改变补料的速率，如边界控制实现。 在分批培养的前期μ应维持在其最大值μmax；下一阶段应保持在μc上。这种控制策略可理解为细胞生长和产物合成的两阶段生产步骤。 7.2.2.2 分批补料的优化 Shioya将生物反应器的优化分为三个步骤，即过程的建模、最佳解法的计算和解法实现。为此，需考虑模型与真实过程之间的差异和优化计算的难易。 在建模阶段出现的问题之一是怎样定量描述包括在质量平衡方程中的反应速率。 图7—6 生物反应器优化的三个步骤 Shioya等对分批培养进行优化和控制方法如图7—7所示，用一模型鉴别和描述比生长速率与比生产速率之间的关系，藉最大原理获得比生长速率的最佳策略和这一策略得实现。 图7—7 分批培养中实现最佳生产的方法 实现在建模阶段拟解决的问题之一是定量描述物料平衡中的以基质、产物等浓度表示的各反应速率。分批培养中的最大的目标是在一定的运转时间tf下使产量最大化。其目标函数，即累积的产量J。可将方程(7—16)和式(7—17)积分，用式(7—18)表达。 对胞外产物： 对胞内产物： 7－16 7－18 7－17 V：液体体积 X：细胞浓度； P：产物浓度，g／L； p：细胞中产物含量，mg／g； Z：细胞量VX； μ ：比生产速率，在此被看做是决定性变量，其变化取决于基质补料速率的变化。 比生长速率是过程的重要参数之一，表征生物反应器的动态特性。为了获得最大的细胞产量，应在培养期间使μ值最大。为此，应使培养基中的糖浓度保持在一最适范围。如没有现成的在线葡萄糖监控仪，可控制RQ值和乙醇浓度。但应强调指出，RQ和乙醇浓度的控制只能用于使比生长速率最大化。 为了维持分批培养中μ值不变，常用一指数递增的补料策略q(t)=q0·eμt。这可使生长速率维持恒定，直到得率系数减小。故可用补料办法控制比生长速率。但如果计算补料速率所需的初始条件和参数不对，则比生长速率便根本不等于所需数值。 酿酒酵母的培养温度会影响其比生长速率和酸性磷酸酯酶的比生产速率。 当温度低一些，27oC有利于μ值；温度高一些，32.5oC有利于酸性磷酸酯酶的比生产速率的提高。最终产物浓度与改变温度的时间(从μmax到μc之间的关系的试验与计算(略)，证明6 h是最适合的。 举例： 在补料-分批发酵的基础上，间歇放掉部分发酵液(带放)便可称为半连续发酵。 带放是指放掉的发酵液和其他正常放罐的发酵液一起送去提炼工段。 7.2.3 半连续发酵 带放的原