1、 CO2对发酵的影响 溶氧对发酵过程的影响还必须与其他参数配合起来分析。 例如:搅拌对溶氧和菌的呼吸有较大的影响,但分析时还要考虑到它对菌丝形态、泡沫的形成、CO2的排除等其他因素的影响。 七 、二氧化碳和呼吸商 (1)有时,CO2可作为重要的基质: 例1:精氨酸的合成过程中其前体氨甲酰磷酸的合成需要CO2基质。 例2:无机化能营养菌能以CO2作为惟一的碳源加以利用。 例3:异养菌在需要时可利用补给反应来固定CO2。细胞本身的代谢途径通常能满足这一需要。如发酵前期大量通气,可能出现CO2受限制,导致适应(停滞)期的延长。 各种微生物的临界氧值以空气氧饱和度表示:细菌和酵母为3%~10%;放线菌为5%~30%和霉菌为10%~15%。 指不影响产物合成所允许的最低溶氧浓度 通过在各批发酵中维持溶氧在某一浓度范围,考查不同浓度对生产的影响,便可求得产物合成的临界氧值。 合成的临界氧值 呼吸临界氧值不一定与产物合成临界氧值相同: 例如:卷须霉素和头孢菌素的呼吸临界氧值分别13%~23%和5%~7%;其抗生素合成的临界氧值则分别为8%和10%~20%。 生物合成临界氧浓度并不等于其最适氧浓度。 前者是指溶氧不能低于其临界氧值; 后者是指生物合成有一最适溶氧浓度范围,即除了有一底限外,还有一高限。 例如:卷须霉素发酵,40~140 h维持溶氧在10%显然比在0或45%的产量要高。 培养液中溶氧浓度的变化可以反映菌的生长状况。 菌种活力、接种量、培养基不同,溶氧在培养初期开始明显下降的时间不同,一般在l~5 h内,这也取决于供氧状况。通常在对数期明显下降,从下降的速率可估计菌的大致生长情况。溶氧低谷到来的早晚与低谷时的溶氧水平随工艺和设备条件而异。 二次生长时溶氧往往会从低谷处上升,到一定高度后又开始下降。这是利用第二种基质的表现。 生长衰退或自溶时会出现溶氧逐渐上升。 发酵过程中溶氧浓度的变化: 举例: 抗生素发酵在前期10~70 h间通常会出现一溶氧低谷阶段。 土霉素在10~30h;卷须霉素、烟曲霉素在25~30 h;赤霉素在20~60h;红霉素和制霉菌素分别在25~50h和20~60 h间;头孢菌素C和两性霉素在30~50 h;链霉素在30~70 h。 即使是专性好气菌,过高的溶氧对生长可能不利。 原因:氧的有害作用是通过形成新生O,超氧化物基02-和过氧化物基022-,或羟基自由基OH-,破坏许多细胞组分体现的。有些带巯基的酶对高浓度的氧敏感。 次级代谢产物为目标函数时,控制生长不使过量是必要的。 培养过程中并不是维持溶氧越高越好: (二) 溶氧作为发酵异常的指示 (1)、有些操作故障或事故引起的发酵异常现象能从溶氧的变化中得到反映。 例1:停搅拌,未及时开搅拌或搅拌发生故障,空气未能与液体充分混合均匀等都会使溶氧比平常低许多。 例2:一次加油过量也会使溶氧水平显著降低。 (2)、中间补料是否得当可以从溶氧的变化看出。 例如:赤霉素发酵,有时会出现‘发酸’现象。这时,氨基氮迅速上升,溶氧会很快升高。这是由于供氧条件不强的情况下补料时机掌握不当和间隔过密,导致长时间溶氧处于较低水平所致。溶氧不足的结果,产生乙醇,并与代谢中的有机酸反应,形成一种带有酒香味的酯类,视为‘发酸’。 (3)、污染杂菌 遇到这种情况溶氧会一反往常迅速(一般2~5 h内)跌到零,并长时间不回升。这比无菌试验发现染菌要提前几个小时。 但不是一染菌溶氧就掉到零,要看杂菌的好气情况和数量,在罐内与生产菌比,看谁占优势。 有时染菌后溶氧反而升高。原因:生产菌受到杂菌抑制,而杂菌又不太需氧。 (4)、作为质量控制的指标 例1、天冬氨酸发酵,前期好气培养,后期转为厌气培养,酶活可大为提高。掌握转换时机颇为关键。当溶氧下降到45%时由好气切换到厌氧可提高酶活6倍。 例2、 在酵母及一些微生物细胞的生产中溶氧是控制其代谢方向的指标之一。 溶氧分压要高于某一水平才会进行同化作用。若补料速度提高,溶氧分压跌到临界值以下,便会出现糖的不完全氧化,生成乙醇,结果酵母的产量减少。 例3、溶氧浓度变化还能作为各级种
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