提取蛋白的常规方法.docxVIP

1、原料的选择 早年为了研究的方便，尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经 常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小， 如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料， -105 -蛋白质提取与制备 Protein Extraction and Preparation 因而对提取要求更复杂一些。 原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑，注意选含量高、来源丰富及成 本低的原料。尽量要新鲜原料。 但有时这几方面不同时具备。 含量丰富但来源困难，或含量 来源均理想，但分离纯化操作繁琐，反而不如含量略低些易于获得纯品者。 一般要注意种属 的关系，如鲤的心肌细胞色素 C较马的易结晶，马的血红蛋白较牛的易结晶。要事前调查 制备的难易情况。若利用蛋白质的活性， 对原料的种属应几乎无影响。 如利用胰蛋白酶水解 蛋白质的活性，用猪或牛胰脏均可。 但若研究蛋白质自身的性质及结构时， 原料的来源种属 必须一定。研究由于病态引起的特殊蛋白质（本斯 .琼斯氏蛋白、贫血血红蛋白）时，不但 使用种属一定的原料， 而且要取自同一个体的原料。 可能时尽量用全年均可采到的原料。 对 动物生理状态间的差异（如饥饿时脂肪和糖类相对减少） ，采收期及产地等因素也要注意。 2、前处理 a、细胞的破碎 材料选定通常要进行处理。要剔除结缔组织及脂肪组织。如不能立即进行实验，则应冷 冻保存。除了提取及胞细外成