食品微生物检验技术 培养基的制备 培养基的制备微课视频.ppt

《食品微生物检验》 重庆化工职业学院 环境与质量检测学院 《食品质量与安全》精品课程系列 主讲人：黄月 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。 根据物理装态分类 1）液体培养基 不加凝固剂的液体状态的培养基； 2）固体培养基 琼脂含量一般为1.5%-2.0%，培养基冷区后呈固体状态； 3）半固体培养基 琼脂含量一般为0.2%-0.8%，培养基冷却后呈半固体状态。 1.试剂 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水、1mol/L HCl、1mol/L NaOH 2.器材 高压蒸汽灭菌锅、漏斗、电炉、烧杯、试管、三角瓶、棉塞、量筒、pH试纸、玻璃棒、药匙等。 确定配方 称量、溶解 定容 调pH 分装、加塞 包扎 灭菌 质量检测和保存 斜面的放置示意图 分装器 ① ② ③ ④ 1、蛋白胨很容易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品是要防止药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干再称取另一种药品。 2、pH不要调过头，以免回调影响培养基各离子的浓度。 3、分装过程中，注意不要使培养基粘在管或瓶口上。 培养基配好后，为什么必须立即灭菌？ 片头，PPT背景+音乐 * 解说词： 大家好！今天我们一起来学习培养基的制备。（老师出镜+字幕+本页PPT） * 解说词：（字幕+PPT图片动画） 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。用于培养微生物的培养基应具备以下条件：①适宜的营养物质，所有微生物生长繁殖均需要碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源；②合适的pH，如细菌生长最适宜的pH范围为7.0-7.6,放线菌为7.5-8.0，真菌为4.5-6.0；③维持无菌状态。 解说词：（字幕+PPT图片动画） 培养基按物理状态分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基三种。液体培养基不添加琼脂,营养物质分布均匀,常用于在实验室进行微生物生理代谢活动研究及大规模的工业生产； 固体培养基琼脂含量一般为1.5%-2.0%,常用于微生物分离、纯化、鉴定、计数和菌种保藏等方面的研究,可制成斜面、平板等形式； 半固体培养基琼脂含量一般为0.2%-0.8%,常用于观察微生物的运动特征、厌氧菌的培养、菌种鉴定、菌种保藏等。 解说词： 下面我们学习培养基制备的操作步骤。（字幕+PPT图片） 解说词：（字幕+PPT图片） 本实验以制作牛肉膏蛋白胨固体培养基为例讲解，所需实验材料为: 1.试剂 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、水、1mol/L HCl、1mol/L NaOH； 2.器材 高压蒸汽灭菌锅、漏斗、电炉、烧杯、试管、三角瓶、棉塞、量筒、pH试纸、玻璃棒、药匙等。 解说词：（PPT图片） 切换到拍摄视频。1.称量：按实际用量计算后，准确称量各种药品放入烧杯中。牛肉膏可放在硫酸纸上称量，称好后连同硫酸纸一起放入烧杯中，烧杯中加入适量蒸馏水，将硫酸纸上的牛肉膏用水洗下后，弃去硫酸纸。蛋白胨极易吸潮，故称量要迅速，称量结束后及时盖上瓶盖。（PPT图片） 切换到拍摄视频。2.溶解：将称好的药品置于大烧杯中，在烧杯中加入所需要的水量，并用玻棒搅拌，隔以石棉网小心加热溶解，在琼脂溶解时注意控制火力，防止沸腾而溢出容器。 切换到拍摄视频。3、定容：待全部药品溶解后，倒入量筒中，加水至所需体积。 切换到拍摄视频。4、调pH：在调pH值前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果偏酸,则用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH值达到7.6。反之,用1mol/L HCl进行调节。 切换到拍摄视频。5.分装：分装过程中，注意不要使培养基粘在管、瓶口上，以免引起污染。 注意：固体装入试管的量不宜超过试管高度的1/5，半固体不宜超过1/3，装入三角瓶中的量以烧瓶总体积的一半为限。 切换到拍摄视频。6.加塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶上塞好棉塞，以阻止外界微生物污染培养基，并保证有良好的通风性能。 切换到拍摄视频。7.包扎：加塞后将全部试管用棉绳捆好，再在棉塞外包一层报纸，以防止灭菌是冷凝水润浸棉塞，最后用棉绳扎好，同时用记号笔注明培养基的名称、配制日期、组别。 切换到拍摄视频。8.灭菌：将上述培养基以121℃、15min高压灭菌。 切换到拍摄视频。9.将灭菌后的培养基置于35℃恒温培养箱内培养24小时，无任何细菌生长为合格，即可判读所灭的培养基是无菌的、合格的。 解说词：（字幕+PPT图片动画） 将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成斜面。斜面长度不超过试管长度l／2为宜。如制作半团体或固体深层培养基时，灭菌后则应垂直放置至凝固。 解说词：（字幕+PPT图片动画） 将装在三角瓶或试管中已灭