黄芩苷的提取和分离纯化.pdfVIP

姓名：黄 冰 专业：药 化 学号：2111140006 黄芩中黄芩苷的提取和精制 一、 实验目的 1 掌握从黄芩中提取、精制黄芩苷的原理、方法及操作要点。 2 掌握黄芩苷的结构鉴定原理及方法。 二、 实验原理 黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物, 具有一定的脂 溶性, 所以在提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液。 黄芩苷为葡萄糖醛酸苷, 具有弱酸性, 其可在碱性溶液中溶解, 形成钠盐,在提取液中加酸酸化，使黄芩苷游离析出。利用黄芩苷能溶 于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离， 行精制。 本实验选用了 60% 乙醇回流提取，酸沉、碱溶、酸沉的方法 行 精制，并对精制品 行了简单的定性鉴别，没有对照品，所以没做定量 实验。 三、实验材料与仪器 材料：黄芩干燥根，硅胶 G 薄层层析板 仪器：UV2550 紫外可见分光光度计（日本岛津），Spectrum 100 傅立叶红外光谱仪，旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），LXJ-Ⅱ离心沉 淀机（上海医用分析仪器厂），200g 摇摆式高速中药粉碎机，电子天平， 循环水式真空泵，抽滤装置，圆底烧瓶（500ml），水浴锅，冷凝管，索氏 提取器，层析缸 试剂：2mol/L 盐酸，60% 乙醇，10%氢氧化钠，乙酸乙酯，甲醇， 甲酸 四、 实验步骤 1 黄芩苷的提取 将黄芩干燥根粉碎，称取粗粉 100g，装入 1L 的圆底烧瓶，加入 4 倍量即 400ml 的 60% 乙醇，搅拌均匀，90 回流提取 1h。提取完 行 抽滤，将滤渣倒入圆底烧瓶中，加 300ml 60% 乙醇继续回流 30min，重 复上一步再回流30min。合并 3 次滤液，65 减压浓缩至无醇味，将水 液水浴加热到 80 ，用 2mol/L 的盐酸调PH 至 1~2，保温 30min，室温 静置 12h，沉淀，2000r/min 离心 2min，弃上清，向沉淀中加 10 倍水量 即 700ml，搅拌均匀，加 10%氢氧化钠调PH 至 7，静置 1h，2000r/min 离心 2min，弃沉淀，将上清液加热至 40 ，搅拌均匀，加入等体积即 700ml 的 60% 乙醇，静置 1h，2000r/min 离心 2min，弃沉淀，将上清液 水浴加热至 80 ，用 2mol/L 的盐酸调PH 至 1~2，保温 30min，室温静 置 1h，沉淀，离心，弃上清液，得粗黄芩苷湿重 43g。 2 黄芩苷的精制 向粗黄芩苷中加入 7 倍水量即 300ml，水浴加热至 70 ，10% 氢氧化钠调 PH 至 7，完全溶解后，用 2mol/L 的盐酸调 PH 至 6，加乙 醇至含醇量 70%，未出现明显沉淀，所以没过滤，用 2mol/L 的盐酸调 PH 至 1~2，70 保温 20min，静置过夜。次日，沉淀很少，又 80 保温 30min，离心，弃上清，得精制品，向圆底烧瓶中加入约 60 倍量甲醇， 将精制品装入索氏提取器的滤纸中，加热回流至提取液颜色很浅，趁 热抽滤，滤液减压浓缩一半，冷却，静置，结晶析出，静置 30min，过 滤，甲醇洗涤，得黄芩苷再精制品。用 40 倍量甲醇加热回流溶解，重 复上述步骤可得黄芩苷重结晶。 3 黄芩苷的薄层层析 吸附剂：硅胶G 薄层层析板，厚 0.25~0.3mm 展开剂：乙酸乙酯- 甲醇- 甲酸-水（7 ：2 ：0.5 ：0.5 v/v/v） 样品配成合适浓度的甲醇液，用点样毛