【培训课件-临床色谱质谱检验技术】_色谱分析概论-（一）final.pptVIP

二、定性参数——保留值 1. 死时间t0 2 .保留时间tR 3. 调整保留时间t’R * 还有另外两个柱效参数：塔板数（n）和塔板高度（H），在下节课讲解，大家可以先记住衡量柱效的参数总共有5个。 * 第二章 色谱分析概论 《临床色谱质谱检验技术》 本章教学要求 色谱法概述 常用色谱术语 《临床色谱质谱检验技术》 色谱法定义 小结及思考 目的 学习掌握色谱法的定义、色谱分析的原理、气相色谱仪和液相色谱仪的构造，熟悉常用色谱术语、色谱柱性能参数及色谱的定性和定量，并了解色谱发展简史和色谱仪的有关检测器； 为后续色谱质谱联用技术章节的学习打下理论基础。 第二章教学要求 目标 掌握： 色谱分析原理 色谱仪的构造（气相和液相） 熟悉： 色谱柱（气相和液相） 色谱定性与定量 常见色谱术语 了解： 色谱的发展史 色谱仪检测器（气相和液相） 第二章教学要求 教学形式及学时 教学形式：理论教学 学时：4 第二章教学要求 色谱法概述 《临床色谱质谱检验技术》 引言 反映代谢情况 含量低 干扰物质多 引言 准确识别 引言 完全分离 色谱分析是一种分离技术 色谱分析的主要目的是对混合物中的目标物进行分离和定量 引言——色谱分析 色谱分析以其高超的分离能力为特点，是分析工作的基石； 色谱分析几乎可用于所有化合物的分离和测定，无论是有机物、无机物，低分子或高分子化合物，以及有生物活性的大分子也可以进行分离和测定。 引言—色谱分析的特点 引言—色谱分析的主要应用 医药科学 食品科学 法庭科学 生命科学 材料科学 环境科学 石油化工 化学化工 色谱法起源于20世纪初，1906年俄国植物学家米茨维特做了如图的实验。 色谱发展简史 植物色素分离为不同的色带——色谱法(Chromatograph) 茨维特的整个实验是在一根管中完成的，又称为柱色谱 色谱发展简史—叶绿素分离 1931年奥地利科学家库恩等重复了茨维特的某些实验，用氧化铝和碳酸钙分离了 α β γ—胡萝卜素。库恩因此于1938年获得了诺贝尔化学奖； 后来陆续发展出了，纸色谱、薄层色谱、气相色谱、液相色谱。 色谱发展简史 薄层色谱和纸色谱（Paper Chromatograph ） 薄层色谱（Thin Layer Chromatograph，TLC）操作步骤： 给出起始线 点样 浸入展开剂（流动相） 喷洒显色剂 晾干 刮出目标物斑点 定性、定量分析 气相色谱（Gas Chromatography，GC） 1952年詹姆斯（James）和马丁发表了从理论到实践的比较完整的气-液色谱法，为此获得了1952年的诺贝尔化学奖。 液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC） 1967年，美国科学家荷瓦斯（Horvath）提出高效液相色谱法 常用色谱术语 《临床色谱质谱检验技术》 色谱流出曲线和色谱峰 色谱参数 相平衡参数 定性参数 定量参数 柱效参数 分离参数 常见色谱术语 色谱流出曲线和色谱峰 色谱参数 相平衡参数 定性参数 定量参数 柱效参数 分离参数 常见色谱术语 色谱流出曲线是检测信号随时间的变化曲线。由于信号强度正比于组分浓度或质量，所以其实际上是组分浓度随时间的变化曲线。 一、色谱流出曲线（色谱图 Chromagtogram） 色谱流出曲线(色谱图) 二、色谱峰(Peak)和基线（ Base Line） 基线：色谱流出曲线上，没有组分流经时的曲线 色谱峰：色谱流出曲线上突起的部分，即组分流经检测器产生的信号 色谱峰 基线 三、对称因子 A 正常峰 B 拖尾峰 C前延峰 噪声（RN） 未知的偶然因素引起的基线起伏现象 漂移（d） 基线随时间朝某一方向的缓慢变化，可以用单位时间基线水平的变化来衡量，漂移主要是实验条件不稳定引起的。 噪声（RN） 漂移（d） 四、噪音（Noise）和漂移 （Drift） 色谱流出曲线和色谱峰 色谱参数 相平衡参数 定性参数 定量参数 柱效参数 分离参数 常见色谱术语 色谱参数 相平衡参数 分配系数 保留因子 定性参数 保留值 保留时间 保留体积 相对保留值 保留指数 定量参数 峰高 峰面积 柱效参数 标准差 半峰宽 峰宽 理论塔板数 分离参数 分离度 分离值 分离数 一、相平衡参数—分配系数（Partition coefficient） （色谱）分配系数：是指一定温度下，处于平衡状态时，被分离组分在固定相中的浓度和在流动相中的浓度之比。 分配系数反映了溶质在两相中的迁移能力及分离效能，是描述物质在两相中行为的重要物理化学特征参数。 组分在固定相中的浓度 组分在流动相中的浓度 保留因子：是在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相（s）和流动相(