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- 2020-10-25 发布于北京
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德州职业技术学院
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啤酒生产技术
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实训一 大麦发芽率检验方法
一、大麦发芽试验——4ml水法
1.1 仪器与用具
精密种子发芽箱、 培养皿(直径 10cm)(10对)、滤纸若干
1.2 操作方法
1.2.1发芽床的制备 在直径10cm的培养皿内放入直径9cm的滤纸两张,准确加入 4m L蒸馏水,使滤纸均匀湿润。
注:发芽试验用的一切用具和发芽床,均应经过蒸汽或水煮沸消毒30min或高压灭菌15min以上。
1.2.2从检验杂质后的大麦样品中随机数取两份各100粒完整大麦,均匀排列在滤纸上,盖上皿盖。
1.2.3放入精密种子发芽箱内,温度控制在(18-21)℃。并在发芽箱中置一盛水容器,使箱内湿度接近饱和。在发芽试验期间,注意发芽箱、培养皿每天通风换气一次。24,48,72,120 h后检查发芽情况,及时取出已发芽颗粒。
1.3 结果计算
发芽势 (%) = 100 一 n 式中:n- 72 h后不发芽颗粒数。
发芽率 (%)二 100 一 m 式中:m- 120 h后不发芽颗粒数。
1.4允许差
双试验的允许差应符合表 1规定。如果双试验的差值超过规定,则应进行第三次试验,取符合允许差规定的二次试验结果的平均值作为样品的发芽率.精确至整数百分率。
表 1 发芽势、发芽率双试验允许差
双试验平均值%
95-96
91-94
85-90
77-84
60-76
允许差,%
3
4
5
6
7
二、大麦发芽试验— 染色法
2.1 原理
有发芽能力的大麦种子胚组织里含有脱氢酶,能在种子活细胞里发生还原过程。碘硝基四哇抓化物溶液是无色溶液,能被种子组织吸收,在种子胚组织里参与活细胞的还原过程,从脱氢酶接受氢,经过氧化作用,在活细胞中产生红色稳定的不扩散物质。无发芽能力的种子,则无此反应。由此,根据大麦种子胚组织的染色结果区别有无发芽能力。
2.2 试剂
0.3%( m/V)碘硝基四哇氯化物溶液(C19H13CIIN502):称取0.3g碘硝基四哇氯化物置于小烧杯中,加人100 mL蒸馏水,于约50℃水浴中加热,使之溶解。现用现配。
2.3 仪器和用具
谷粒纵向切断器;特制试管:直径 4.3cm,高 18.5cm; 水泵;恒温水浴锅:控温士1℃; 放大镜 。
2.4 操作方法
2.4.1从拣出杂质后的大麦样品中,随机取 2组(每组 100粒)完整大麦粒,用谷粒纵向切断器沿大麦粒纵向切开,弃去一半,另一半放入特制试管中,加入0.3%碘硝基四哇氯化物溶液浸没,置于50℃的恒温水浴内。同时连接水泵抽出试管中的空气。
2.4.210 min后取出染色后的麦粒,用低倍放大镜观察。
麦粒胚部呈猩红色或淡红色者,作为有发芽能力;麦粒胚部完全未染色或者未染色部分大于胚部的二分之一,作为“死粒”,即无发芽能力。
2.5 结果计算
发 芽 力 (% ) = 100 一 P
式中:P- 胚部完全未染色和未染色部分大于胚部二分之一的颗粒数。
红墨水法
1)浸种 将小麦种子用28-30℃的温水浸泡3-5h,使种子充分吸水膨胀。
2)切取 选择具有代表性的种子100粒,用刀片沿麦种腹沟将种子切成两半。注意待测定的一半一定要带有胚部。
3)染色 先配制好5%的红墨水溶液,混匀后倒入容器皿或瓷碗中,然后将小麦种子均匀摊在培养器皿中或瓷碗中,容量以浸没种子为宜。
4)冲染 染色5-10min后,将染过色的种子用清水冲洗数次,直到冲洗后的水滑颜色为止。
5)观察 种子的胚或叶子不着色,或仅带浅红色的,即为具有生活力的种子;如果胚部呈红色,与胚乳着色程度相同,即说明该种子已丧失了生活能力。
参考:(SN/T 0800.14-1999、GB/T 5520-2011)
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