甘蓝种荚白化基因alb1的遗传分析及其定位.pdfVIP

摘 要 甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L. ）是世界范围内广泛种植的一种重要的十字花科蔬 菜作物。甘蓝种荚一般呈绿色，种荚白化是一种有害突变，其可直接影响其正常结实。但是甘蓝 种荚白化突变体可作为研究叶绿素合成、光合作用机制和白化基因功能的材料。本研究以甘蓝白 荚突变体16S569-4 为材料，对其种荚表型特征、遗传规律进行研究，并利用BSA-Seq 结合InDel 标记构建了该基因的遗传连锁图谱。主要研究结果如下： 1. 16S569-4 在开花前均生长正常，但在结荚期种荚出现白化，植株其余部分均正常。通过对 白荚材料16S569-4 及绿荚材料TO1000 的种荚的色素含量进行测定发现，16S569-4 的叶绿素a、 叶绿素b 和胡萝卜素显著低于TO1000 ；利用石蜡切片观察细胞结构，结果发现突变体细胞壁畸 形、细胞界限不明显、轮廓不清晰；利用电镜切片观察细胞叶绿体超微结构发现，突变体16S569- 4 叶绿体内噬锇颗粒明显增多。 2. 将突变体 16S569-4 和TO1000 进行杂交。F1 植株的种荚均表现绿色，F2 群体中绿荚与白 2 荚符合3:1 分离比；BC P 群体中绿荚与白荚符合1:1 分离比。经卡方 （ ）测验，表明16S569- 1 1 4 的种荚白化性状是由隐性单基因控制，暂命名为alb1 3. 16S569-4 和TO1000 杂交获得的F2 作为作图群体，利用BSA-Seq 技术，将目的基因定位 到0-3.79M 物理区间内；利用InDel 标记对alb1 构建了高密度遗传连锁图谱。最终将alb1 定位 于 1 号染色体InDel 标记yw 31 和yw14 之间63.2kb 的物理区间内。对物理区间内基因序列进行 分析，在63.2kb 的物理区间内共有 10 个预测基因，通过基因功能注释发现一个与花的发育相关 基因Bo1g005810 ，编码非顶端分生组织蛋白，可能是引起种荚白化的原因。通过对Bo1g005810 进行序列分析，发现突变体 16S569-4 与绿荚材料TO1000、W4 、W30 、W42 相比，在启动子区 均存在2 处SNP 变异。因此将Bo1g005810 作为重要的候选基因。 关键词：结球甘蓝，种荚白化，BSA-Seq，基因定位 I Abstract Cabbage (Brassica oleracea L. var. capitata L.) is an important cruciferous vegetable crop grown worldwide. Seed pods of Brassica oleracea is generally green, albino is a harmful mutation, which can directly affect its normal seeding. But albino mutants of Brassica oleracea can be used to study chlorophyll synthesis, photosynthetic mechanism and albino gene function. In this study, the phenotypic characteristics and genetic rules of the pod of cabbage 16s569-4 were studied, and the genetic linkage map of the gene was constructed by combining BSA-Seq and InDel markers. The main research results are as follows: 1. There was albinism in the seed pod at pod stage, and the rest of the plant was norma