农产品黄曲霉毒素Myroides Odoratimimus菌株3J2MO生物降解研究.pdfVIP

摘 要 黄曲霉毒素是由黄曲霉(A.flavus)等真菌产生的高毒，致癌，致突变，免疫毒性和致畸的次生代谢产 物，玉米、花生等农产品易受污染。因此，从 “农田到餐桌”控制黄曲霉毒素，是减少作物污染的有 效策略。在多种防治策略中，生物防治在产前、收获和产后的黄曲霉毒素污染防控中具有较好的应用 前景。本研究，综述了农产品中黄曲霉毒素生物防治研究进展，研究了短黄杆菌3J2MO 对黄曲霉毒素 降解速率的影响因素，包括 pH 值，温度，培养时间，细菌接种量，毒素浓度，金属离子，营养物质 等。此外，我们还对短黄杆菌3J2MO 降解黄曲霉毒素的降解产物进行了研究，并对降解产物进行了安 全性评价。 第一部分：黄曲霉毒素不仅是作物生产的主要限制因素，而且严重威胁农产品消费安全及人畜健康， 因此各国对其设置了严格的限量标准。为了预防和控制农产品中黄曲霉毒素污染，近年来对生物防治、 抗病品种选育和杀菌剂防控策略开发进行了广泛研究，提出了对应的防治策略。其中，黄曲霉毒素生 物防治具有环境友好、污染残留小等优势，在作物产前和产后防控中显示出较大的应用前景，可有效 降低毒素污染风险，保障食品和饲料质量安全。本研究建议原位监测产毒真菌及黄曲霉毒素污染水平， 通过抑制真菌的生长和黄曲霉毒素的产生预防毒素污染，通过去除和降解黄曲霉毒素降低农产品中黄 曲霉毒素污染水平，并建议让消费者知情和参与。本研究还分析了生物防控的作用模式，明确了用于 生物防治的生物、种类和剂型，以及生物制剂的作用和应用。 第二部分：AFB1 是 I 类致癌物，是毒性最强的的黄曲霉毒素，具有致癌和诱变作用,可在摄入、吸入 或皮肤接触时对人体和牲畜造成伤害，对农产品/食品和饲料行业造成了严重的危害。本文研究发现了 一株能够高效降解 AFB1 的菌株—短黄杆菌 3J2MO 。采用高效液相色谱偶联荧光检测器（HPLC-FLD ） 进行AFB 定量研究，并对不同影响因素对AFB 降解能力等 7 1 1 进行了表征。研究发现以 1x10 CFU/mL 为 接种量，在LB 培养基中37℃培养48 小时后，加标 100ppb 的AFB1 的降解率达93.82%；在pH 为8.5 的条件下，最大降解速率为89.23%；细菌接种量为1x108 CFU/mL 时，降解率为55.78%；34℃和37℃ 培养条件下，降解率分别为 71.5%和 71.21% ；以蔗糖和可溶性淀粉为碳源，牛肉浸提液和乙酸铵为氮 源处理均能促进降解。Mg2+和 Ca2+ 离子是 AFB1 降解的活化剂，Mn2+ 、Fe3+ 、Zn2+ 和 Cu2+ 是很强 的抑制剂。研究表明，该菌株具有潜在黄曲霉毒素污染解毒作用，可用于农产品和食品工业基质的生 物防控策略。 IV 第三部分：目前，尚无短黄杆菌 3J2MO 降解 AFB1 的降解产物的相关报道。本研究利用 UHPLC- Orbitrap fusion 质谱共鉴定出 5 种无毒的降解产物。AFB1 被短黄杆菌 3J2MO 降解的机制可能是生物降 解，由其表达的降解酶参与 AFB1 降解。对于 AFB1 标准品其降解率达到了 93.83%。尽管本研究已成 功鉴定出5 种中间降解产物 (P2, C H N O )、(P3, C H N O ) 、(P4, C H O ) 、(P5, C H O ) 及(P6, 18 33 3 3 12 22 2 2 14 16 2 8 4 3 C H O ), 但详细全面的降解路径还有待进一步解析。实验室前期对3J2MO 安全性评价研究发现，通 13 16 4 过对小鼠和大鼠急性腹腔注射，急性口服毒性和急性经皮毒性的致病性试验，3J2MO 降解 AFB1 的降 解产物无致病性，属于低毒性。 因此，3J2MO 对 AFB 的降解具有高效、安全、环保等特点，为农产品和食品加工业预防和消解黄曲霉 1 毒素污染提供新的潜在方法。 关键词：短黄杆菌3J2MO，黄曲霉毒素，生物防控，污染，降解，抑制，农产品，质量安全