OS-QA-012-00 沉降菌检测操作规程.docVIP

广东和本堂科技制药有限公司 文 件 名 沉降菌检测操作规程 页数 1 of 3 文件编号 OS-QA-012-00 生效日期 年 月 日 制 定 人 审 核 人 批 准 人 制定日期 审核日期 批准日期 颁发部门 质量保证部 分发部门 质量保证部 物资部 变更原因： 目的：建立沉降菌检测操作规程，规范该项操作。 范围：适用于沉降菌测定。 职责：微生物检测员实施本规程。 规程： 1.简述：沉降菌是用标准提及的方法（沉降暴露法）收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。其沉降浓度用CFU/皿(30min)表示。此外，用擦拭法收集培养的建筑物表面（墙壁、地板、天花板等）以及操作人员衣着上的细菌亦属于沉降菌测试的内容。 2.测试原理：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 2.仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。 3. 培养皿：Φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。 4. 培养基：使用普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。 5.恒温培养箱：必须定期对恒温培养箱的温度计进行检定。 6.测试 6.1测试规则 6.1.1测试状态分类：静态测试和动态测度两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。沉降菌测试前，被测试洁净室（区）应经过消毒，温度、相对湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定的范围内。 6.1.2测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。静态测试时，室内测试人员 文件名 沉降菌检测操作规程 文件编号 OS-QA-012-00 页数 2 Of 3 不得多于2人。 6.1.3测试时间：对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行时间不少于10min后开始；对非单向流，如10000级、100000级、300000级的净化房间，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。 6.1.4采样点的位置：可以同悬浮粒子测试点。工作区采样点的位置离地0.8-1.5m（略高于工作面）；可在关键设备工作活动范围处增加采样点。 6.2测试步骤 6.2.1采样方法：将已制备好的培养皿按要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。 6.2.2培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于30-35℃的恒温培养箱中培养，时间不少于48h。每批培养基应有对照试验（每批选定3只培养皿），检验培养基本身是否污染。 6.2.3菌落计数：用肉眼计数，标记或者菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查有否遗漏。若