2021年人教版高中生物选修一专题二微生物的培养与应用知识点归纳.docVIP

专题二 微生物培养和应用 课题一 微生物试验室培养 ·培养基：大家根据微生物对营养物质不一样需求，配制出供其生长繁殖营养基质，是进行微生物培养物质基础。 ·培养基根据物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取一个多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，能够形成肉眼可见菌落。依据菌落特征能够判定是哪一个菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物分离和判定，半固体培养基则常见于观察微生物运动及菌种保藏等。 ·根据成份培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成份已知化学物质配制而成，其中成份种类百分比明确，常见于微生物分离判定。天然培养基是用化学成份不明天然物质配制而成，常见于实际工业生产。 ·根据培养基用途，可将培养基分为选择培养基和判定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要微生物生长，促进所需要微生物生长。判别培养基是依据微生物特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以判别不一样类别微生物。 ·培养基化学成份包含 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 、生长因子等。 ·碳源：能为微生物代谢提供碳元素物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物代谢提供氮元素物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气要求。比如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧条件 ·无菌技术·取得纯净培养物关键是预防外来杂菌入侵，要注意以下多个方面： ①对试验操作空间、操作者衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰周围进行。 ④试验操作时应避免已经灭菌处理材料用具和周围物品相接触。 无菌技术除了用来预防试验室培养物被其它外来微生物污染外，还有什么目标？ 答：无菌技术还能有效避免操作者本身被微生物感染。 ·消毒和灭菌区分 消毒指使用较为温和物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物（不包含芽孢和孢子）。消毒方法常见煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于部分不耐高温液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。 灭菌则是指使用强烈理化原因杀死物体内外全部微生物，包含芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 灭菌方法： ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； ②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ； ③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。 ④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。 比较项 理化原因作用强度 消亡微生物数量 芽孢和孢子能否被消亡 消毒 较为温和 部分生活状态微生物 不能 灭菌 强烈 全部微生物 能 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 （1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 （2）倒平板操作步骤： ①将灭过菌培养皿放在火焰旁桌面上，右手拿装有培养基锥形瓶，左手拔出棉塞。 ②右手拿锥形瓶，将瓶口快速经过火焰。 ③用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口缝隙，右手将锥形瓶中培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿皿盖。 ④等候平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。 ·倒平板操作讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么措施来估量培养基温度？ 提醒：能够用手触摸盛有培养基锥形瓶，感觉锥形瓶温度下降到刚刚不烫手时，就能够进行倒平板了。 2.为何需要使锥形瓶瓶口经过火焰？ 答：经过灼烧灭菌，预防瓶口微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为何要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后培养基表面湿度也比较高，将平板倒置，既能够使培养基表面水分愈加好地挥发，又能够预防皿盖上水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板过程中，假如不小心将培养基溅在皿盖和皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为何？ 答：空气中微生物可能在皿盖和皿底之间培养基上滋生，所以最好不要用这个平板培养微生物。 纯化大肠杆菌 （1）微生物接种方法最常见是平板划线法和稀释涂布平板法。 （2）平板划线法是经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作。将聚集菌种逐步稀释分散到培养基