兽医流行病学：第十一章 血清流行病学.ppt

第11章 血清流行病学 §1.概述 一、定义：血清学(免疫学)和流行病学原理和方法来研究血清中特异抗体的产生和分布规律，阐明疾病在畜群中的分布与原因，并在采取相应措施后，检验其效果。 血清中物质：生化测定、抗体测定 二、用途： 1.查明疾病在动物群体中流行情况，特别是隐性感染为主疾病，需用血清学方法； 2.探讨某些疾病的地理分布 3.检查疫苗免疫效果； 4.病因研究，特别是爆发传染病时，比较发病初与康复期双份血清，效价升高4倍有诊断意义。 5.疾病监测与预报；用于疾病消灭计划中，淘汰阳性，建立健康畜群。 三、方法 （一）调查方法 短期调查：作为诊断用，从群体中随机采集一定量样本检测，另一种是暴发时采双份血清比较； 长期调查：确定疾病的时间、空间和畜群间分布情况，血清学监测，建立健康群时均用到；对于疫苗免疫为主的疾病，需监测母源抗体的影响。 （二）检测方法： 1.凝集类　2.沉淀类　3.补体反应类　4.标记类 （三）分析方法：结果与正常参考水平比较； §2.血清抗体的测定 一．抗体量的表示法 血清转阳：由阴性变为阳性； 1、稀释度的对数转换 血清稀释时通常以几何级数(常用倍比稀释)，平均滴度常以几何均数计算，并使样本的分布趋向正态分布。 表示滴度的方法： ①直接表示或倒数 . ② Log2平均滴度 （1）算出对数滴度的算术平均数--即对数平均滴度. （2）对数平均滴度的反对数--即几何平均滴度； 以表11-1为例：(0+1+2+3+4+5+6)/7=21/7=3 对数平均滴度 二．抗体测定 1.单个稀释度测定：均只作一个稀释度，如ELISA　最后比较OD值； 2.单系列稀释测定：作若干个稀释度，但每个稀释度均只测一次；如HA或HI； 3.多系列稀释测定：作若干个稀释度，但每个稀释度均有多个重复管（孔、头）需测几次，以求得更准确的滴度。 例如　TCID50、LD50、EID50，以可出现感染、死亡等指标为判定标准，常用50%为判定终点。 TCID50计算 表11-2，说明中和效价的计算方法，不过，在病毒学中通常用Reed-Muench二氏法计算，见以下内容，结果都一样。 血清 稀释度 稀释系数对数10x 细胞 病变 正 常 　　　累　　　计　　　和 病变 正常 病变比例 保护率% 1/1 0.00 0 5 0 26 0/26 100 1/2 -0.3 0 5 0 21 0/21 100 1/4 -0.6 0 5 0 16 0/16 100 1/8 -0.9 1 4 1 11 1/12 99.2 1/16 -1.2 1 4 2 7 2/9 78.8 1/32 -1.5 3 2 5 3 5/8 37.5 1/64 -1.8 4 1 9 1 9/10 10 1/128 -2.1 5 0 14 0 14/14 0 计算 1. 距离比例＝（高于50%保护率－50%的保护率）÷（高于50%保护率－低于50%的保护率） 　　　　＝（78.8－50）÷（78.8－37.5） ＝0.697 2 .Log10 ED50=高于50%保护率的血清稀释度对数＋距离比例×稀释系数的对数 ＝－1.2＋0.697×0.3 ＝－1.01 ED50=－1.01的反对数为（？） 三．畜群中血清抗体水平的估计和比较 检测抗体存在否？抽样检查，按结果分为阳、阴性两类，此时涉及暴露水平，样本量大小、所用检查的方法。 抗体水平的比较 第三节 血清学试验的解释 精密性（refinement） 抗原成分存在精密性：型、亚型、毒株之分； 取决于： ①试验方法的精密性； ②所用抗原的性质； ③所测抗体的类型 二、准确性（accuracy） 1．阳性结果： 真阳性：实际感染； 假阳性：交叉反应、非特异性反应（尤其是血清高浓度时）；故血清学反应中通常要将被检血清作一系列的稀释； 2．阴性结果 真阴性：未有感染或免疫耐受； 假阴性：采血时间不当，抗体尚未出现；试验选择不当；非特异性抑制物；不完全抗体或封闭抗体；试验不敏感； 三、敏感性和特异性 上图：左移虚线，特异性下降，假阳性增加； 下图：左移虚线，敏感性增加，假阴性下降； 初筛时趋向于使敏感性增加； 第13章 分子流行病学 研究内容 传染病（病原分类、传染源、传播途径、进化分析、耐药性） 肿瘤、心血管病、遗传代谢病 研究方法 核酸电泳图谱分析、 核酸酶切图谱分析、 寡核苷酸指纹图谱分析 基因探针和核酸杂交 PCR 核酸序列分析 其他技术