生物化学：04章核苷酸和核酸3.pptVIP

目 录 第八节 核酸酶和DNA限制性内切酶 一、核酸酶（nuclease） 能水解核酸的酶为核酸酶 核酸酶都是磷酸二酯酶（phosphodiesterases） 核酸酶的分类 按底物专一性分类：核糖核酸酶(RNase)和脱氧核糖核酸酶(DNase) 按作用方式分类：内切核酸酶和外切核酸酶 内切核酸酶：从核酸的内部切割核酸链，产生核酸链片段。 外切核酸酶：从核酸链的一端逐个切断磷酸二酯键，释放单核苷酸。按磷酸二酯键断裂方式：3’-核酸酶和5’-核酸酶 核酸酶对其底物的作用具有特异性 二、限制性内切酶（restriction endonuclease） 限制性内切酶是从细菌中分离的一类专门识别和水解特定核苷酸序列的内切酶类。这类酶在原核生物体内，用于“防御”外来DNA的入侵，将外来DNA以独特的方式切成无感染能力的片段，而自身不受损害（甲基化作用） 。 1. 限制性内切酶的分类 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 基因工程技术中常用Ⅱ型 不需要ATP参加； 不对DNA进行甲基化或其它方式修饰。 专门识别和切割特定的核苷酸序列，这个序列一般含4—6 个核苷酸残基，并具回文结构。 2. II型限制性内切酶 Ⅱ类酶识别序列特点 回文结构palindrome 切口（kerf）：粘端，平端 3.限制性内切酶的种类（约1000多种） 4.限制性内切酶在基因重组中的应用 * * 淀粉酶，纤维素酶 目 录 * * 淀粉酶，纤维素酶