酶工程：5酶的分子修饰.pptVIP

* * * * * * * * * * * 所谓随机引物是含有各种可能排列顺序的寡核苷酸片段的混合物，它可以与任意核苷酸序列杂交，起到聚合酶反应引物的作用。可用DNaseI降解小牛胸腺DNA获得（6-8个核苷酸）或用人工合成方法获得（6个核苷酸）。 * 然而并非所有的反应底物都可以作为微生物的营养成分，对同一营养物的利用可能有不同的酶（酯酶和脂酶），为了解决这些问题人们设计了各种各样的检测培养基筛选方法 * Reetz等为这一技术的发展作出了杰出的贡献，把红外检测方法用于手性酶的筛选，他们采用德国ThermaCAM SC1000热检测仪来检测脂酶催化乙烯基乙酸脂手性拆分反应中的热量变化，R和S底物被成对的放在孔板中进行单独检测，R底物的催化反应是一个放热反应，成像中表现为“热点”，相反S底物表现为“冷点”，通过对热点的分辨他们的检出了R底物特异性酶[21]。使用先进的红外检测设备和热辐射系数校正技术[22]，可以提高检测的灵敏性，利用时间分辨技术还可以检测手性酶，在微孔板中反应可以很容易的实现高通量筛选。 酶的筛选 酶的筛选可分为选择培养基筛选法和检测培养基筛选法。 选择培养基筛选法 通过添加或减少某种成分使目的菌株获得生长优势，而其它菌株的生长受到抑制，通过多次的筛选分离最终得到目的菌株。 单一碳源的选择性培养基，使能够利用反应底物的微生物获得生长优势而大量增殖，无法利用反应底