负载类肝素聚合物电纺支架的制备及与血管细胞相互作用研究.docVIP

负载类肝素聚合物电纺支架的制备及与血管细胞相互作用研究 中文摘要：静电纺丝技术是通过外加电场的条件下，使高分子雾化成聚合物微小射流，被接收后固化成纳米纤维薄膜。它是一种制备生物组织工程材料的重要方法。本课题将聚己内酯和聚苯乙烯磺酸钠2-甲基丙烯酰胺基吡喃葡萄糖p(SS-MAG)以不同配比混合，通过同轴静电纺丝技术，形成具有生物活性和功能的纺丝，观察聚苯乙烯磺酸钠2-甲基丙烯酰葡萄糖胺p(SS-MAG)对内皮细胞的增殖和粘附的影响。以2-甲基丙烯酰葡萄糖胺(MAG)为原料，通过RAFT的手段制备聚苯乙烯磺酸钠2-甲基丙烯酰葡萄糖胺p(SS-MAG)。之后，再与聚己内酯以不同配比混合制成静电纺丝膜。运用具有生物活性的静电纺丝膜作为载体，之后再在材料上面培养人脐静脉内皮细胞，观察其黏附以及增殖情况。通过实验结果显示，随着聚苯乙烯磺酸钠2-甲基丙烯酰葡萄糖胺p(SS-MAG)含量的增加，静电纺丝膜对于人脐静脉内皮细胞的黏附诱导和增殖效果有促进作用，为未来制备人工血管或新型血管支架材料提供了很好的研究基础。 关键词：血管组织工程，血管支架，静电纺丝，类肝素 前言 第一章 血管组织工程料概述 1.1.1组织工程概念 组织工程是一门跨学科的新兴热门学科，它将生命科学和材料学两者相结合，并运用工程学的方法，研究人工合成的含有活细胞的有功能的组织，来替代人体由于疾病、外伤等原因，所造成的结构或功能受损的组织或器官[1]。，为了达到修复创伤和重建功能的目的，其主要过程为从活体组织(多数从与人结构功能相似的动物组织中提取)中提取少量细胞(种子细胞)，再将其与生物相容性较好、可降解、可吸收的生物材料相融合，再将细胞材料复合物，重新植入体内，植入的细胞可以随之在体内不断增殖并分化，与此同时生物材料可以降解成可以被人体吸收的物质，最终在体内形成相应的组织或器官[2]。与传统医学相比较，组织工程具有无创伤修复的重要特点。在目前的研究和临床应用的方面，拥有广阔的发展空间。 1.1.2 血管组织工程概念 血管组织工程是指利用细胞结构和功能完整的血管壁细胞和降解性好的高分子材料进行制备血管替代材料的学科[3]。其是利用组织工程学的方法替代血管的构建，将种子细胞种植于血管支架上，从而模拟血管细胞外基质的作用与结构。所选用的材料应具有良好的生物相容性、血液相容性、不容易发生免疫排斥反应、可控的生物降解性、方便大量生产、长期储存、随时取用等特点，血管组织工程目前广为认可的最为理想的替代血管的方法[4]。 1.1.3 血管组织工程支架材料 血管支架材料是种子细胞在体外生长所需支撑物，为人造血管提供一定的机械强度和力学特性，同时还可以模拟血管细胞外基质的作用，促进细胞的黏附与生长、增殖[5]。 血管组织工程支架材料主要有天然材料、脱细胞外基质、合成生物可降解高分子材料、活性细胞膜片等。 天然材料主要有胶原、纤维蛋白、弹性蛋白、透明质酸、甲壳素、丝素蛋白、葡聚糖明胶、细菌纤维素等[6]。但是由于它机械性能差的缺点，尽管天然材料拥有血管支架生物相容性好、无免疫排斥反应的优点，在临床应用方面依然受到限制。 脱细胞外基质血管支架完全由天然细胞外基质组成，其优点是具有良好的生物相容性和机械力学性能，理想的支架结构和形状。缺点是力学强度和管壁顺应性不佳，且降解之后形成的物质可能引起免疫排斥和疾病传播。 合成生物可降解高分子材料主要有聚乙醇酸(PGA)[7]、聚乳酸(PLA)、聚己内酯(PCL)等以及它们的复合物。 可降解高分子血管支架的优点是合成高分子材料来源广泛、加工方法多样、力学与降解性能可调，但是其缺点是细胞亲和性不佳。 另外一种构建血管支架的方法是基于细胞膜片的组织工程血管，这种方法无需使用支架材料[8]。选用自体细胞作为支架用细胞，然后通过长时间(6～9月)细胞培养，可以分泌大量的细胞外基质，进而形成一定力学强度的细胞膜片。虽然这种方法没有免疫排斥现象，但其生产周期过长限制了它的进一步发展。 1.1.4 血管组织工程支架材料的制备方法 利用适当成型技术(熔融/溶液挤出法、盐沥滤法、热致相分离法、静电纺丝法、卷绕成型及其复合技术等)加工上节材料，可在体外形成自体血管结构和形貌相似的血管支架。但是熔融/溶液挤出法制备的支架可能残留有毒溶剂，且不易控制孔径大小和分布的缺点[9]。与其他纳米纤维制备方法相比，静电纺丝能够制备小直径( 6 mm)的纤维网状多孔结构[10]，并具有良好的机械性能和力学性能，还有利于细胞黏附的表面，使得支架的顺应性与天然血管基本匹配。在组织工程血管支架构建领域静电纺丝技术凭借这些特点，成为近年血管组织工程支架研究