水稻中胚轴伸长基因qME1的克隆与功能分析(1).pdfVIP

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2021-01-09 发布于江苏
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水稻中胚轴伸长基因qME1的克隆与功能分析(1).pdf

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目录摘要i ABSTRACTiii 缩略语表vi 1 前言1 1.1 研究问题的由来1 1.2 水稻直播的发展现状1 1.2.1 直播稻类型、特点1 1.2.2 直播稻发展现状、趋势2 1.2.3 水稻直播出苗的动力源分析4 1.3 水稻中胚轴伸长4 1.3.1 水稻中胚轴伸长机制4 1.3.2 影响中胚轴伸长的因素6 1.3.3 中胚轴伸长相关基因的克隆7 1.4 乙烯对植物生长发育的调节9 1.4.1 植物乙烯的生物合成10 1.4.2 乙烯信号传导途径10 1.4.3 乙烯参与幼苗破土机械压力响应12 1.5 赤霉素GA 对植物发育的调节14 1.5.1GA 的生物合成途径14 1.5.2 GA 信号传导途径17 1.5.3GA 在植物发育、环境响应方面的研究进展17 1.5.4 乙烯和赤霉素协同响应水淹胁迫19 1.6 本研究的目的与意义21 2 材料与方法22 2.1 实验材料22 2.1.1 植物材料22 2.1.2 田间材料管理22 2.1.3 载体和菌株22 2.1.4 分子生物学和化学试剂23 II 华中农业大学2020 届博士研究生学位（毕业）论文 2.2 实验方法23 2.2.1 水稻黄化苗中胚轴长度以及破土出苗鉴定23 2.2.2 ACC GA 23 乙烯前体和赤霉素含量测定 2.2.3 水稻基因组DNA 提取24 2.2.4PCR 扩增24 2.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测25 2.2.6 开发与筛选具有多态性的分子标记及基因定位26 2.2.7 预测候选基因26 2.2.8 质粒构建26 2.2.9T4DNA 连接和InFusion 重组连接28 2.2.10 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化29 2.2.11 农杆菌感受态细胞的制备及转化30 2.2.12RNA 提取、cDNA 第一链的合成及Real-timePCR30 2.2.13 大提质粒DNA32 2.2.14 水稻中胚轴以及叶鞘部分蛋白提取及Westernblot 检测33 2.2.15水稻原生质体提取和转化34 2.2.16BiFC观察35 2.2.17 酵母双杂交实验35 2.2.18 原核蛋白表达与纯化36 2.2.19Co-IP 分析37 2.2.20 荧光素酶(LUC)活性检测37 2.2.21DNA 凝胶阻滞(EMSA)实验37 3 结果与分析38 3.1 水稻控制中胚轴伸长QTLqME1 的精细定位与功能分析38 3.1.1 中胚轴伸长在水稻幼苗迅速破土中的作用38 3.1.2 中胚轴伸长的细胞学分析39 3.1.3 控制中胚轴伸长QTLqME1和幼苗出苗率QTLqER1 的初步定位39 3.1.4qME