鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究.pdfVIP

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鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究 目 录 摘 要 i Abstract iii 缩略语表vi 第一章 文献综述 1 1 鸡蛋蛋白质功能及磷酸化修饰 1 1.1 鸡蛋蛋白质的功能活性 1 1.1.1 抗氧化活性 1 1.1.2 抗菌活性 1 1.1.3 免疫活性 2 1.2 蛋白质磷酸化修饰 2 2 蛋白质组学概述 3 2.1 蛋白质组学的定义 3 2.2 蛋白质组学技术 4 2.2.1 蛋白质分离 4 2.2.2 质谱鉴定 5 2.2.3 定量蛋白质组学技术 5 3 蛋白质组学在鸡蛋中的应用 6 3.1 鸡蛋蛋白质的全组学研究 6 3.2 鸡胚蛋蛋白质的比较差异组学 8 4 鸡蛋蛋白质的磷酸化修饰组学研究 9 5 活性肽研究进展 11 5.1 鸡蛋中主要的活性肽 11 5.1.1 抗氧化肽 11 5.1.2 降血压肽 12 5.1.3 抗菌肽 12 5.1.4 降血糖肽 13 5.2 肽组学研究在鸡蛋中的应用 13 6 本课题的研究意义与研究内容 14 I 华中农业大学2020 届学术学位硕士毕业论文 6.1 研究意义14 6.2 研究内容15 第二章 基于TMT 标记的鸡胚蛋孵化期间差异定量磷酸化组学分析16 1 材料与方法16 1.1 实验材料16 1.1.1 实验原料16 1.1.2 主要试剂16 1.1.3 主要仪器与设备17 1.2 实验方法17 1.2.1 蛋白提取17 1.2.2 胰酶酶解18 1.2.3 TMT 标记18 1.2.4 HPLC 分级18 1.2.5 修饰富集19 1.2.6 液相色谱-质谱联用分析19 1.2.7 数据库搜索20 1.2.8 质谱质控检测21 1.2.9 生物信息学分析21 2 结果与分析21 2.1 质谱质控检测结果21 2.2 样品重复性检验22 2.3 磷酸化蛋白及磷酸化位点鉴定总览23 2.4 差异磷酸化蛋白及磷酸化位点总览24 2.5 磷酸化基序分析34 2.6 GO 分析36 2.7 差异磷酸化的蛋白质亚细胞结构定位37 2.8 差异磷酸化的蛋白质结构域富集37 2.9 PPI 分析38 2.10 磷酸化蛋白质组与蛋白质组的比较39 3 讨论50 II 鸡胚蛋孵化期间蛋白质磷酸化修饰组学及其肽组学研究 4 小结 52 第三章 鸡胚蛋孵化期间蛋清内源肽组学分析 54 1 材料与方法 54 1.1 实验材料 54 1.1.1 实验原料 54 1.1.2 主要试剂 54 1.1.3 主要仪器与设备 55 1.2 实验方法 55

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