血液一般检验-血涂片制备和染色.pptVIP

第二章 血液一般检验 Giemsa 染色法 ■染色原理 ：与 Wright 染色法基本相同， Giemsa 染色法 加强了天青的作用，提高了噻 嗪类染料的效果 。 ■试剂 ： Giemsa 染料 1.0g; 甘油 66 ml; 甲醇 66ml 。 第二章 血液一般检验 ■染色 ： 1 ）标记血涂片：用蜡笔在的血涂片一端编号。 2 ）固定血膜：用甲醇固定 3 ～ 5 分钟。 3 ）血膜染色：将固定的血涂片置于被 pH6.4 ～ 6.8 磷酸盐缓冲液稀释 10 ～ 20 倍的 Giemsa 染液中， 浸染 10 ～ 30 分钟，取出后用流水冲洗，干燥后备用。 第二章 血液一般检验 Wright-Giemsa 染色法 在 Wright 染色过程中， 以稀释 Giemsa 染液 代替缓冲液，或先用 Wright 染色法染色后， 再用稀释的 Giemsa 染液复染 ，或者在 Wright 染液配方的基础上，每 1.0g Wright 染料添加 0.3g Giemsa 染料，染色步骤同 Wright 染色法。 第二章 血液一般检验 血涂片染色的方法学评价 方法 评价 Wright 染色法 最常用的染色方法，染色时间短，对胞 质成分及中性颗粒等染色效果好 ，但对 胞核的染色不如 Giemsa 染色法 Giemsa 染色法 染色过程易控制，不易被污染， 对胞核 和寄生虫等着色较好，结构更清晰 ，而 胞质和中性颗粒着色较差，染色保存时 间久，但染色时间长，价格高。 Wright- 对胞质、颗粒、胞核均着色鲜艳，对比 Giemsa 染色法 鲜明， 但此法染液变性快、易污染，为 临床一般检验次选方法 第二章 血液一般检验 第二节 改良牛鲍血细胞 计数板的结构和使用 本 节 内 容 一 . 计数板结构 ◆ 结构 ◆ 区域划分 二 . 计数板使用 ◆ 使用 ◆ 计数顺序与原则 ◆ 质量保证 ◆ 评价 ◆考核方法 第二章 血液一般检验 一、改良 Neubauer 计数板结构 计数板上下各一个计数池 第二章 血液一般检验 计数板结构区域划分 1mm 1 m m 第二章 血液一般检验 二、计数板使用 准备计数扳 稀释血液 充液 静置 显微镜计数 第二章 血液一般检验 第二章 血液一般检验 第一节 第二章 血液一般检验 血涂片制备和染色 第二章 血液一般检验 本 节 内 容 一 . 血涂片制备 ◆ 载玻片要求 ◆ 血涂片制备方法 ◆ 方法学评价 ◆ 质量保证 二 . 血涂片染色 ◆ 染料 ◆ 染色方法 ◆ 方法学评价 ◆ 质量保证 第二章 血液一般检验 一 . 血涂片的制备 载玻片的要求 新玻片上有 游离碱质 ，须清洗后使用。 使用时切勿用手触及玻片表面。 第二章 血液一般检验 血涂片的制备方法 薄血膜推片法 制 手工涂片法 备 方 法 自动涂片法 厚血膜涂片法 第二章 血液一般检验 手工薄血涂片法 取 EDTA 抗凝血 滴血约 推片 干燥 50μl 第二章 血液一般检验 第二章 血液一般检验 第二章 血液一般检验 第二章 血液一般检验 两玻片的角度以 30-45 °为宜，轻轻将双凹片向 前匀速推进，即涂成血液薄膜。 30~45 ° 第二章 血液一般检验 血涂片 第二章 血液一般检验 手工厚血涂片法 第二章 血液一般检验 全自动推片染片机 根据 HCT 可以设定 8 个水平的推片方案 第二章 血液一般检验 血涂片制备的方法学评价 方法 薄血膜推片法 评价 用血量少、操作简单，临床应用最广，主要用于观察血细 胞形态及仪器法检测结果异常时的复查 。某些抗凝剂可使 血细胞形态发生变化，分类时应注意鉴别。白细胞减低患 者的标本经离心后取棕黄层（有核细胞和血小板集中层） 涂片，可提高异常细胞的阳性检出率。 对疟原虫、微丝蚴等的阳性检出率高。 厚血膜涂片法 仪器自动涂片法 血涂片中细胞分布均匀、形态完好，且推片与染色可和血 液分析仪构成流水线作业， 适用于大批量标本的处理 。但 需要较高的投入。 第二章 血液一般