试谈园林植物的组织培养育苗.docxVIP

第七节园林植物的组织培养育苗 ■概述 1繁殖速度快 2繁殖脱毒苗 3不受季节限制 培养室 培养室 组织培养繁殖的基本原理 ?细胞全能性 ?植物体中每个完整细胞核的细胞，都具有 该植物的全部遗传信息和产生新的完整植 株的能力。 ?体细胞（植株的一部分）一?完整植株 ?组培室的建立 组培条件 接种室 准备室 1 1 ?灭菌设备: 高压蒸气灭菌锅 用于培养基、蒸憾水和接种器械的灭菌消毒。 工作原理：在密闭的蒸锅内，0. 1MPa的压力下， 锅内温度达121°C0在此蒸气温度下，可以很快杀死 各种细菌及其高度耐热的芽鞄。  使用方法：首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热 器，然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌锅上的螺丝，关闭放气 阀通电。待压力上升到0. 05MPa时，打开放气阀，放出空气, 待压力表指针归零后，再关闭放气阀。三次放气后，关阀再通 电，压力表上升达0. 1-0. 15Mpa时，维持20min后，断电，待 压力降至零时，打开入入气阀，取岀灭菌材料。 注意事项：①对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介 质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严 格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变 质或效力降低，不能随意延长时间；②对于一些布制品，如实 验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装 好，高压灭菌20-30min；③高压灭菌前后的培养基，其pH值下 降0.2-0.3单位。因此，调PH值时，可适当调高0.-0.3个单位。 2?接种设备：无菌超净工作台 用于培养材料的消毒及接种。 使用前，将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启，灭 菌15min后，关闭杀菌按钮，打开照明按钮，即可在上 面进行操作。 推车 厂2乡 培养瓶 5 - y 出 Ml,忙 。共斟切樑斡当唯尋壬甘 T\ 彳壷王’詬柔誓明打％口卑① ②恒温箱：又称培养箱，可用于原生质体和酶 制剂的保温，也可用于组织培养材料的保存及 ③摇床与转床：在液体培养基中，可改善培养基中 的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获 得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。 ①温室②防虫网室■■I■ ■ ￡ J ①温室 ②防虫网室 ■■I ■ ■ ￡ J 2004? 06?诵 q 2■驯化设备 5、 其它辅助设备 ①培养基灌猎机兀洗瓶 -06-07 ②空调机：用于接 种室和培养室温度 的控制。 ③除湿机：使培 养室的湿度保持 在定的范围内。 ④烘箱：用于干燥洗净后的玻 璃器皿，还可用80°C的温度烘 干组织培养植物材料以测定干 物质。以及某些材料的 ④烘箱：用于干燥洗净后的玻 璃器皿，还可用80°C的温度烘 干组织培养植物材料以测定干 物质。 以及某些材料的 ⑤冰箱：用于在常温下易变 性或失效的试剂和母液的储 藏，细胞组织和试验材料的 冷冻保藏， 预处理。 ⑦天平和显微镜：天平包括分析 天平，电子天平，药物天平等， 用于制备母液时培养基组成成分 的称取。如一些需要量少的激素 和微生素类物质，天平的精确度 要到O.OOOIg,这就要求精确度 更高的分析天平。 显微镜包括解剖镜，生物显微镜，倒置显微镜等。 如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。 ⑧酸度计：用于校正培养基和酶制剂的PH。 培养基成分 ?基本组成 ?无机元素 -1大量元素：N P K C a Mg S - 2 微量元素：Fe B Zn Cu Mo Cl ?有机成分 -维生素肌醇氨基酸 ?糖 -蔗糖葡萄糖果糖 ?琼脂(0?5~0?8%) -琼脂粉 —琼脂条 ?植物生长调节剂 ?细胞分裂素类 一 KT 6-BA ZT ?生长素类 -IAA IBA NAA 2,4-D ?赤霉素类 -GA3 ?天然添加物 一椰子汁酵母提取液土豆汁麦芽提取物等 ?水 -蒸馄水纯净水 一自来水 ? pH值(5?6~5?8) -1mol/L HCI 或 NaOH ?其它 -吸附剂（活性炭） -抗氧化剂（Vc柠檬酸等） 培养基种类 MS培养基 Miler培养基 Nitsch培养基 H培养基 White培养基 N6培养基 培养条件 ?温度：25°C左右 ?光照：30001x^1 OOOOIx ?时间：12~16h 操作技术 1、经营思想 ?经營思想是从事经營活动.解决经營问題 的指导思想，它旻随着生产力发畏而发畏 的。蛊经營思楓指导下形成经營管理理论, 经營管理理论用于指导生产经營卖践，不 断促进生产力发畏。 (-)、经营策略 1、市场需求的领测 c二丿、市场预测 2.卡场占有率的预测 (三丿 产嬴的营編 生产规栈与生产计划 1、试管苗增殖率的佑算 增殖率：是指植场快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。 估算认管苗的幣植量，是以苗、茅或未生根嫩莖为 单住》—般以苗或瓶为计算单住。 年生产童CY)决走于每瓶苗数Cm)