大粒车前子多糖抗炎与缓解壬基酚毒性作用及其机制研究.pdfVIP

摘要 摘 要 车前子是传统的药食两用植物车前草的种子，具有祛痰、止泻、利尿、降血 糖、免疫调节、抗氧化、降血脂等生物功能。车前子多糖作为其重要的生物活性 物质，在发挥活性功能的过程中起到重要作用。本论文以江西吉安产大粒车前子 为原料，探讨大粒车前子多糖对肝脏炎症的保护作用，对壬基酚（Nonylphenol ， NP ）导致的肝脏毒性、肾毒性、生殖毒性以及肠道屏障损伤的缓解作用，利用代 谢组学手段分析该多糖对NP 引起的肝损伤特征代谢物的影响。本论文主要研究 内容及结论归纳如下： 1. 大粒车前子多糖对脂多糖诱导的小鼠肝损伤具有保护作用。 BALB/c 小鼠灌胃不同剂量的大粒车前子精多糖（Plantago asiatica L. crude polysaccharide ，PLCP ）连续21 天后，腹腔注射脂多糖（Lipopolysaccharide ，LPS ） 以构建肝损伤模型，12 h 后摘眼球取血并处死，摘除肝组织进行分析。结果发现， PLCP 预处理能够下调LPS 诱导小鼠血清和肝脏炎症细胞因子的过表达，提高肝 脏谷胱甘肽过氧化物酶 （Glutathione peroxidase ，GSH-Px ）和锰超氧化物歧化酶 的活力，从而增强肝脏的抗氧化能力。此外，PLCP 还能够抑制肝脏一氧化氮的 分泌，以及LPS 腹腔注射引起的肝脏诱导型一氧化氮合酶 （Inducible nitric oxide synthase，iNOS ）和环氧合酶-2 （Cyclooxygenase-2 ，COX-2 ）表达的增加，提高 肝脏金属硫蛋白的表达。该结果表明，PLCP 对炎症相关的肝损伤具有保护作用。 2. PLCP 对NP 暴露导致的大鼠肝损伤具有保护作用。 SD 大鼠每天灌胃给予不同剂量的PLCP 1 h 后，给予口服暴露50 mg/kg 体 重的NP ，持续45 天。结果发现，PLCP 灌胃处理可降低NP 暴露大鼠肝脏相对 重量，提高胸腺相对重量，改善损伤的肝脏组织形态，并且显著下调血清中谷丙 转氨酶和谷草转氨酶的表达。PLCP 还能够提高NP 暴露导致的肝脏抗氧化酶活 性的降低，并降低丙二醛 （Malondialdehyde ，MDA ）及iNOS 的水平，调节促氧 化/抗氧化之间的平衡稳态。与此同时，PLCP 能够抑制肝脏凋亡相关蛋白及 mRNA 的表达，抑制线粒体介导的肝细胞凋亡，通过调节PI3K/Akt 信号通路保 护NP 导致的肝损伤。此外，代谢组学分析发现，PLCP 对肝脏中14 种代谢物均 产生了影响，并通过调节牛磺酸和亚牛磺酸代谢及谷胱甘肽代谢这两个代谢通 II 摘要 路，来发挥其解毒作用。该结果表明，PLCP 可缓解NP 暴露引起的 SD 大鼠肝 损伤。 3. PLCP 对NP 暴露导致的大鼠肾损伤具有一定的缓解作用。 建立NP 染毒大鼠模型，研究PLCP 对NP 导致的肾损伤的保护作用。结果 发现，PLCP 能够下调血清中尿素氮的表达水平，提高肾脏过氧化氢酶（Catalase， CAT ）和GSH-Px 酶的活性，同时降低MDA 、脂质过氧化物（Lipid peroxidation ， LPO ）、iNOS 及总一氧化氮合成酶 （Total nitric oxide synthase ，tNOS ）的水平， 从而调节氧化和抗氧化之间的平衡，减轻肾毒性。该结果表明，PLCP 对NP 暴 露导致的大鼠肾损伤具有一定的保护作用。 4. PLCP 对NP 暴露导致的大鼠生殖系统损伤具有缓解作用。 以NP 染毒致生殖系统损伤大鼠为模型，灌胃给予不同剂量的PLCP ，研究 PLCP 对NP 致生殖系统损伤的保护作用。结果发现，PLCP 干预可改善NP 导致 的睾丸组织形态损伤，提高睾丸及附睾中抗氧化酶的活性，降低MDA 、LPO 、 iNOS 的水平，从而维持促氧化/抗氧化之间的平衡。此外，PLCP 还能够调节血 清及睾丸中的激素分泌水平，抑制睾丸细胞凋亡，通过调节PI3K/Akt/mTOR 信 号通路发挥解毒功能。该结果表明，PLCP 能够缓解NP 暴露导致的SD 大鼠生 殖系统损伤。