脓液伤口标本细菌学检验标准操作规程.docxVIP

脓液伤口标本细菌学检验标准操作规程 目的 规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程，确保检验 结果准确可靠。 2.适用范围 脓液培养或涂片检查。 3.标本 3.1 标本类型 脓液。 3.2 标本采集 3.2.1 开放性脓性和脓性分泌物  用无菌盐水或  75%酒 精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡处采集  2 支拭子，  1 支 为涂片检查用，  1 支作培养用。 3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物  用灭菌棉拭取多部位 创面的脓液或分泌物， 置灭菌试管内 （注明采集部位） 送检。 3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射 器抽取，将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为 厌氧菌感染时，应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。 3.3 标本拒收标准 3.3.1 标本标识与化验申请单不符。 3.3.2 标本不是无菌留取。 3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过 2 小时。 试剂、仪器 1 革兰染液、氧化酶试剂、 3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦克凯平板、相关生化试剂等。 4.2 VITEK  鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡（  GNI+  ）、革 兰阴性菌药敏卡（  GNS ）、革兰阳性菌鉴定卡（  GPI）、革兰 阳性菌药敏卡 （ GPS）、真菌鉴定卡 （ YBC ）、药敏纸片、 TBA 板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。 4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、 CO2 培养箱等。 细菌鉴定和药敏质控参见《质量管理程序》 检验步骤 接收标本后，立即对标本进行编号、登记。 6.1 涂片检查 革兰染色镜检， 报告“查见革兰×性菌，形似××菌”或报告“未查见细菌” 。 6.2 培养 6.2.1 一般细菌培养 标本接种于接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板和麦康凯（或 EMB 、中国蓝）琼脂平板，置于 5%-10%CO2 环境中， 35°C 培养 18-24 小时，根据菌落及染 色形态特点，作出初步判断，作出初步判断，再按各类细菌 的生物学特性进行鉴定。 6.2.2 厌氧菌培养 取脓液标本接种于厌氧血琼脂平板 及其他选择平板，置于厌氧菌环境培养，根据生长情况及涂 片染色结果，按厌氧菌生物学特性进行鉴定。 6.2.3 嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平 板，置 5%-10%CO2 环境中培养。 6.2.4 结核分枝杆菌培养 参见《结核分枝杆菌检验 标准操作规程》 。 6.2.5 真菌培养 可用沙氏培养基。 7.结果报告 查见致病菌，报告菌名和药敏结果。 8.注意事项 8.1 对于某些特殊病人 （如气性坏疽病人） ，在菌种鉴定 及药敏试验结果尚未报出之前，根据涂片镜检情况，采取治 疗措施。 8.2 厌氧菌培养取得样本后，拭子应立即置于厌氧运送 管，尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接 抽取，避免接触环境中氧气。 临床意义 从脓液及创伤标本中能检出的病原菌微生物种类很多， 最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染，包括 有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、 外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮、外科切口 及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌 是金黄色葡萄菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌 中，除上述细菌外，主要为结核分枝杆菌。脓液标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等，常为继发感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌，其次为水肿梭菌、败毒梭菌和溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌或其他需氧菌感染。器官脓肿和机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。 危急值报告 培养出产气荚膜梭菌及时按传染病报告。 参 考 文 献 中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL32:2008 医 学实验室质量和能力认可准则在微生物学检验领域的指南.2008 周庭银编著 .临床微生物学诊断与图解 .第二版 .上海：上海科学技术出版社， 2007 叶应妩，王毓三，申子瑜主编全 .国临床检验操作规程第 .三版 .南京：东南大学出版社， 2006 Murray PR. Manual of Clinical Microbilogy.9th ed.Washington：ASM Press， 2007 [5]ISO15189:2007 医 学 实 验 室 - 质 量 和 能 力 认 可 准 则.2007 编写人： AAA 、 BBB 操作人：本室操作人员 批准人：