图示中最核心的步骤是基因表达载体的构建,该技术中使用的载体是______________。为使D4-lg基因在感染T细胞中高效表达,需要把D4-lg基因片段插入基因表达载体的__________________之间。被图中两种病毒双重感染的T细胞解体后释放的HIV与入侵时相比,差异是____________________。? 【解析】(1)途径一是通过制备杂交瘤细胞生产抗HIV抗体。HIV感染自愈者的浆细胞可以产生抗体,在培养杂交瘤细胞时,除了加入常用的各种营养元素外,还需要加入血凊和血浆,并保持一定的气体环境(主要有O2和CO2),其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。与HIV感染自愈者体内提取的抗体相比,培养杂交瘤细胞所获得抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。 (2)途径二是通过基因工程技术获得HIV疫苗,该过程需要用到逆转录酶、限制酶和DNA连接酶。 (3)途径三的技术中,D4-lg基因的载体是腺相关病毒;为使D4-lg基因在被感染T细胞中高效表达,需要把D4-lg基因片段插入基因表达载体的启动子和终止子之间。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,启动基因的转录。由题干可知蛋白质(D4-lg)能与HIV表面的糖 蛋白结合,从而使HIV失去侵染T细胞的能力,因此被两种病毒双重感染的T细胞解体后释放的HIV与入侵时相比,差异是HIV的衣壳蛋白已经与D4-lg蛋白结合,失去再感染T细胞的能力。 答案:(1)浆细胞(或经过免疫的B淋巴细胞) 维持培养液的pH(或酸碱度) 特异性强、灵敏度高、可大量制备 (2)逆转录酶、限制酶、DNA连接酶 (3) 腺相关病毒(或腺相关病毒粒子或腺相关病毒基因组) 启动子和终止子 HIV的衣壳蛋白已经与D4-lg蛋白结合,失去再感染T细胞的能力 【解析】选A、B、C。只有精子取出后需要用获能液处理,A错误;受精卵发育成原肠胚不适宜移植到母亲子宫内,B错误;三亲婴儿染色体由母亲、父亲共同提供,C错误;三亲婴儿的培育需要使用核移植、胚胎移植等技术,D正确。 15.(不定项)下列实验程序正确的是 ( ) A.蔬菜加工+泡菜盐水→加调料、装坛无氧发酵泡菜 B.挑选葡萄、冲洗、榨汁→无氧发酵果醋→有氧发酵果酒 C.动物组织+胰蛋白酶制备细胞悬液→原代培养→传代培养 D.离体细胞消毒、接种→脱分化形成愈伤组织→再分化→试管苗 【解析】选A、C、D。泡菜制作的流程是原料的休整、洗涤、晾晒、切分等加工过程+泡菜盐水→加入调味料装坛→发酵→成品,A正确;制作果酒和果醋的流程是:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵(无氧发酵)→醋酸发酵(有氧发酵),B错误;动物组织胰蛋白酶制备细胞悬液→原代培养→传代培养,C正确;离体细胞消毒、接种→脱分化形成愈伤组织→再分化→试管苗,D正确。 二、非选择题(共7小题,共55分) 16.(6分)葡萄种植基地为解决葡萄滞销导致的易腐烂问题,引入果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工,获得了较好收益,其生产流程如图所示,据图回答: (1)候选菌A、B细胞中都有的细胞器是______________。? (2)在纯化菌种A时接种了5个平板,每个平板均接种了0.1mL样品并培养。其中乙平板的菌落分布如图,纯化菌种A的接种方法是__________,推测导致出现平板乙可能的操作失误是____________。? (3)在进行菌种A、B的扩大培养过程中,锥形瓶的瓶口应(填序号)________(①敞开 ②密封 ③用透气棉塞塞住),并适时振荡锥形瓶,振荡的目的是____________。? (4)将葡萄加工成果汁时,为提高果汁的产量和品质,应加入适量的纤维素酶,能分解________,瓦解植物细胞壁及胞间层。? 【解析】(1)候选菌A能发酵产生果酒,为酵母菌,属于真核生物,而候选菌B能发酵产生醋酸,为醋酸菌,属于原核生物,真核细胞和原核细胞中都有的细胞器是核糖体。 (2)接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,分析乙培养基培养结果,培养基中的菌落没有呈线性分布,可以推知采用的纯化方法是稀释涂布平板法;由于菌落有聚集现象,可以推知平板乙可能的操作失误是涂布不均匀,导致菌落分布很不均匀。 (3)在进行菌种A、B的扩大培养过程中,既要保证氧气供应,又要防止杂菌污染,则锥形瓶的瓶口应用透气棉塞塞住(③),并适时振荡锥形瓶,振荡的目的是保证氧气的供应,使营养物质与目的菌充分接触。 (4)纤维素酶能分解纤维素,瓦解植物细胞壁及胞间层。 答案:(1)核糖体 (2)稀释涂布平板法 涂布不均匀 (3)③ 保证氧气的供应,使营养物质与目的菌充分接触 (4)纤维素 17.(8分)酸马奶酒是一种以鲜马奶为原料,经乳酸菌和酵母菌共同自然发酵而成的一种古老的乳酸、酒精发酵乳饮料,深受我国内蒙古和新疆地区
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