【国自然】要人兽共患胞内寄生菌病流行特征及病原致病机制研究.docxVIP

项目名称： 重要人兽共患胞内寄生菌病盛行特征及病原致病机制研讨 首席科学家： 陈创夫 石河子大学 起止年限： 2010年1月-2014年8月 依托部分： 新疆生产建造兵团科委 教育部 一、研讨内容 研讨内容 1．布鲁氏菌病、斑驳热和无形体病分子盛行病学和盛行规则研讨 三种病原我国盛行株病原特征及分子盛行病学研讨：经过在要点疫源地进行全面体系的盛行病学查询，树立我国三种病原菌种资源库，剖析我国三种病原盛行株的种型特征以及优势株演替和遗传变异规则，承认风险前言和宿主动物及其在疾病传达中的效果。 2．布鲁氏菌、斑驳热立克次体、无形体侵染和胞内寄生机制的研讨 三种病原基因组学和蛋白组学研讨：经过基因组学、蛋白组学、转座子骤变等功用基因组学技能研讨布鲁氏菌规范菌株、疫苗株和我国盛行株（牛种、羊种、绵羊种布鲁氏菌019株），挑选影响布鲁氏菌毒力和致病性的首要基因及相关外膜蛋白，判定其生物学功用；研讨布鲁氏菌在宿主细胞内、外成长时菌体基因及蛋白表达谱的改动，并提醒差异表达蛋白的生物学功用；经过对我国斑驳热立克次体代表株与国外斑驳热立克次体比较基因组学和蛋白组学研讨，发现我国斑驳热立克次体的首要毒力基因及相关蛋白，清晰其生物学功用；经过对我国无形体盛行株的基因组学研讨，剖析我国无形体盛行株的遗传学特征，清晰其与世界各地盛行株的差异。 布鲁氏菌侵染巨噬细胞、上皮细胞及其胞内寄生机制研讨：经过酵母双杂交、免疫共沉淀、噬菌体展现、siRNA等技能挑选布鲁氏菌侵染巨噬细胞、上皮细胞过程中的宿主因子和相关蛋白，承认其生物学功用；研讨布鲁氏菌的调控基因及效应分子搅扰布氏小体与溶酶体交融以及按捺宿主细胞凋亡的分子效果机制； 斑驳热立克次体与血管内皮细胞彼此效果机制研讨：经过蛋白双向电泳、基质辅佐激光解析/电离串联飞翔时间质谱剖析等发现斑驳热立克次体与血管内皮细胞之间产生特异性彼此效果的分子，清晰其毒力相关分子在致病中所起的效果。 无形体侵染粒细胞分子机制研讨：经过酵母双杂交和免疫共沉淀技能挑选无形体与粒细胞之间产生特异性彼此效果的要害分子，承认其在病原体侵染宿主细胞过程中的效果。3．布鲁氏菌、斑驳热立克次体免疫的分子机制研讨(1) 布鲁氏菌首要保护性抗原及其表位研讨：使用体外抗原诱导表达、ELISPOT和Tetramer等研讨技能，挑选布鲁氏菌首要保护性抗原及其T、B细胞抗原表位。(2) 布鲁氏菌首要保护性抗原表位与宿主MHC分子彼此效果研讨：使用基因芯片和蛋白芯片技能挑选与布鲁氏菌首要保护性抗原蛋白递呈相关的宿主MHC分子品种，研讨其结构特征和表达的时空改动，提醒宿主MHC对布鲁氏菌首要保护性抗原的约束、表达、处理和提呈的影响。(3) 布鲁氏菌免疫躲避的分子机制研讨：经过FACS、ELISA、ELISPOT、免疫细胞和/或分子缺点动物验证技能等，研讨Breg、Treg在布鲁氏菌感染免疫过程中效果的分子机制，说明布鲁氏菌感染免疫应对及免疫躲避的分子机制。(4) 斑驳热立克次体免疫的分子机制研讨：经过对我国斑驳热立克次体与免疫应对发动细胞—树突状细胞之间，激活树突状细胞与T淋巴细胞之间的的彼此效果研讨，发现斑驳热立克次体与宿主免疫细胞之间彼此效果的分子，提醒斑驳热立克次体诱导免疫应对的分子机制。 二、预期方针（一）总体方针把握我国布鲁氏菌病、斑驳热和无形体病的盛行特征和规则，说明三种病原致病的分子机制，取得一批在崇高上具有重要影响的研讨成果，进步我国在三种盛行症防控根底研讨范畴的崇高地位，为国家在疫病防控和公共卫生安全等方面供给科学技能储备及咨询服务。培育一批在人兽共患胞内寄生菌病研讨范畴的专业优秀人才。 （二）五年预期方针1．深化知道我国布鲁氏菌病、斑驳热和无形体病的盛行特征和规则，完结我国三种盛行症的分子盛行病学查询陈述，为疫病防控供给科学决策依据。 2. 树立我国三种病原的菌种资源库和三种盛行症的盛行病学数据库；树立三种病原盛行株遗传信息库。 3. 发现三种病原我国盛行株新的毒力基因并说明其生物学功用，提醒三种病原侵染、胞内寄生、致病和免疫的分子机制，为研制新式疫苗、确诊试剂和挑选药物效果候选靶位基因奠定坚实的理论根底。 4. 培育具有我国优势特征的三种盛行症立异研讨团队2~3个，培育在国内外相关研讨范畴有必定影响力的学术带头人3~5名，培育博士研讨生25名和硕士研讨生60名。 完结高水平SCI录入研讨论文60篇以上。 三、研讨方案（一） 学术思路  环绕严峻损害公民生命健康和畜牧业经济展开重要人兽共患盛行症的防控，保证公共卫生及生物安全这一国家严峻需求，要点处理疫病盛行规则和病原致病分子机制两个要害科学问题。从病原特征及分子盛行病学、病原生态学两个方面研讨三种盛行症的盛行规则；从病原基因组与蛋白组、胞内寄生机制、免