【国自然】禽肌肉和脂肪发育的分子调控机制研究.docxVIP

项目名称： 畜禽肌肉和脂肪发育的分子调控机制研讨 首席科学家： 袁立 厦门大学 起止年限： 2009.1至2013.8 依托部分： 教育部 一、研讨内容 （一）项意图全体想象 动物骨骼肌和脂肪细胞的分解、成长和安排发育的调控进程实践上是内涵的遗传和表观遗传根底和外在的各种信号分子互作的成果。 现在在该研讨中存在的首要问题包含：（1）对安排器官的发育学研讨还八成停留在单个基因或单个分子调控效果的水平，从体系、多层次和调控分子之间网络联络打开的研讨缺少，因而不利于对安排器官的发育从全体和完好进程的视点解析其发育的分子机制；（2）一些调控层次，如表观遗传学、RNA、信号分子、内涵代谢与微环境等层次上的研讨尚属新式，缺少深化研讨的材料，因而难以客观掌握安排器官体系发育多重操控的机制；（3）对骨骼肌和脂肪发育的研讨大多会集在人和实验鼠上，因为有限的物种资源，难以从比较生物学视点全面提醒细胞分解调控网络的发生、打开机制。并且已有的研讨多是针对骨骼肌和脂肪代谢疾病有关的发病机理，研讨存在必定的局限性。（4）近年来，经过干细胞技能和基因敲除等手法，在大小鼠等经典形式动物的骨骼肌和脂肪发育研讨方面取得了一系列的打开，提醒了操控干细胞分解及骨骼肌和脂肪发育的多种重要基因和调控通路。但在猪和鸡上，相应的手法和材料相对缺少，尤其是猪、 鸡骨骼肌和脂肪的胚胎干细胞技能还不行老练，因而多能胚胎干细胞分解为猪、鸡骨骼肌和脂肪前体细胞的分子机制知道缺少；其他形式动物大许多数据尚未在猪和鸡上印证，因而不行明晰猪和鸡骨骼肌与脂肪发育机制的特色；骨骼肌和脂肪发育表观遗传学方面的研讨尚属新式，因而不能能解析猪和鸡种类品系发育差异的机制。（5）尽管转基因猪和鸡都有成功的报导，但技能办法尚未能到达实践出产使用的要求，也未见触及针对调控发育基因方面的研讨。 本项目运用干细胞、功用基因组、非编码RNA、RNA和蛋白组学、信号传导等先进研讨手法，选用比较生物学研讨战略，别离从基因转录与转录后缄默沉静、DNA与蛋白质润饰，外周信号转导通路等层次深化研讨猪和鸡的肌肉和脂肪安排发生、细胞成长和分解进程中，DNA、RNA、蛋白质以及外周信号分子之间互作的调控网络联系和体系发生机制，并在miRNA鸡的培养方面进行攻关，添补发育研讨范畴的一些缺少，可望在猪和鸡等畜禽肌肉和脂肪发育的分子调控理论及其使用方面取得重要打破。 依据上述想象，本项目要点处理下列要害科学问题： 1、说明骨骼肌和脂肪胚胎与成体干细胞自我更新和分解的表观遗传学和网络调控机制。偏重处理猪、鸡多能胚胎干细胞的别离培养及其诱导向骨骼肌和脂肪细胞分解的技能问题，开掘猪和鸡的各种胚胎与成体干细胞向骨骼肌和脂肪分解进程不同阶段的符号忆分子和重要功用基因，提醒这些基因在此进程中的功用与调控机制。 2、说明猪和鸡骨骼肌与脂肪安排细胞发生、分解和成长代谢的遗传、表观遗传及非编码RNA调控的分子机制。在开掘操控猪和鸡骨骼肌与脂肪安排成长与分解重要功用基因和调控通经的根底上，偏重解析这些基因的代谢与表观遗传学调控机制；体系别离判定与猪、鸡与骨骼肌和脂肪发育相关的非编码RNA，提醒其功用机制， 3、说明品系间骨骼肌和脂肪成长发育差异的分子遗传与调理机制。在说明不同种类品系猪和鸡的发育规则的根底上，体系比较不同部位安排和种类品系间发育的遗传、表观遗传及非编码RNA调控的差异，提醒猪、鸡种系骨骼肌和脂肪发育特色的分子机制。 4、探究miRNA鸡培养的新技能手法。 偏重处理进步同源重组、按捺随机整合、去除冗余外源序列的理论与技能问题，构建新式高效的转基因鸡载体，研讨改善转基因鸡的技能操作办法，进步转基因鸡取得功率，研讨使用 miRNA 对特定基因缄默沉静功率操控技能，树立可用于出产实践的 miRNA鸡的培养技能办法。 （二）项意图研讨内容 本项目将在前期作业的根底上对猪、鸡的肌肉和脂肪发育的分子调控机制打开体系深化的研讨，杰出表观遗传学的研讨，解析猪、鸡的肌肉和脂肪发育要害基因的调控网络，偏重研讨猪、鸡种类品系肌肉和脂肪发育差异构成分子机制，进步种类资源的使用，要点攻关 miRNA鸡的培养技能办法。本项意图首要研讨内容包含以下方面： 1、研讨与完善猪、鸡肌肉和脂肪胚胎干细胞和各种成体干细胞别离培养与诱导分解的技能体系。包含猪、鸡胚胎期肌肉鼻祖细胞（MPC）、间充质细胞、骨骼肌卫星细胞和脂肪成体干细胞的体外培养及其自我更新和定向分解的技能办法。 2、进行猪、鸡肌肉和脂肪干细胞自我更新与分解和猪、鸡肌肉和脂肪安排发生、成长进程中的分子标志、重要基因的别离判定，打开对猪、鸡肌肉和脂肪发育进程的重要基因及其调理通路的功用效果与分子机制研讨。包含选用基因表达谱芯片、蛋白质组学等办法，别离判定在猪、鸡肌肉和脂肪干细胞分解与安排发育相关的新基因和分子；研讨这些基