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2021/2/11 * 18.3.1 核酸的结构 核酸分为核糖核酸(RNA)和去氧核糖核酸(DNA)两类. 核酸 核苷酸 核酸酶 OH- 部分水解 核苷 磷酸 戊糖 碱基 RNA中的糖为核糖 DNA中的糖为2-脱氧核糖 2021/2/11 * 核酸中的碱为嘧啶和嘌呤衍生物: 胞嘧啶(C) (RNA,DNA) 尿嘧啶(U) (RNA) 胸腺嘧啶(T) (DNA) 腺嘌呤(A) (RNA,DNA) 鸟 鸟嘌呤(G) (RNA,DNA) 2021/2/11 * DNA,X=H,R=CH2 RNA,X=OH,R=H 核 酸 核 苷 核 苷 酸 核 苷 酸 2021/2/11 * 18.3.2 脱氧核糖核酸(DNA) D N A 双 螺 旋 模 型 DNA具有按照自己的结构精确复制的功能. 2021/2/11 * 新的双螺旋 原有的链 新合成的链 新合成的链 原有的链 图 2.8 DNA的复制 2021/2/11 * 18.3.3 核糖核酸(RNA) 蛋白质是在细胞质中由RNA合成的. 蛋白质合成的第一步是在细胞核中合成信息核糖核酸(mRNA) 信息核糖核酸就是DNA的副本. 在细胞核里合成mRNA与DNA链分开后,转移到细胞质中,与核 糖体中的核糖体核糖核酸(rRNA)结合. 转移核糖核酸(tRNA)约含70-90个核苷酸单位,它的分子量比 mRNA和rRNA小得多,它的作用是把特定的氨基酸带到mRNA 上特定的位置上去,每一种氨基酸至少有一个特定的tRNA. 见P685 图22.9 2021/2/11 * 18.3.4 蛋白质的生物合成 蛋白质的合成可见图22.10中的示意图表示. 在合成蛋白质的过程中,实际上是好几个核糖体和mRNA 结合在一起,它们先后沿着同一mRNA链移动,各自合成出一条 完整的多肽链.也就是说,核糖体在mRNA链经过就“纺”出一条 多肽来. rRNA和 tRNA也是从DNA上某一段转录下来的,只不过 rRNA和 tRNA不能转移成相应的蛋白质分子. 父母把DNA传给子女,有了一定结构的DNA,便产生一定结 构的蛋白质,由一定结构的蛋白质带来一定的形态结构和生理 特性. 2021/2/11 * (2),测定蛋白质分子中多肽链的数目。 通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子量之间的关系,即可确定多肽链的数目。 2021/2/11 * (3),二硫键的断裂 几条多肽链通过二硫键交联在一起。可在可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍存在下,用过量的?-巯基乙醇处理,使二硫键还原为巯基,然后用烷基化试剂保护生成的巯基,以防止它重新被氧化。 反应式见P468 2021/2/11 * 18.2.2.2 N-端氨基酸的测定 Sanger法。2,4-二硝基氟苯在碱性条件下,能够与肽链N-端的游离氨基作用,生成二硝基苯衍生物(DNP)。 在酸性条件下水解,得到黄色DNP-氨基酸。该产物能够用乙醚抽提分离。不同的DNP-氨基酸可以用色谱法进行鉴定。 末端基氨基酸测定 ? 二硝基氟苯(DNFB)法 2021/2/11 * 在碱性条件下,丹磺酰氯(二甲氨基萘磺酰氯)可以与N-端氨基酸的游离氨基作用,得到丹磺酰-氨基酸。 此法的优点是丹磺酰-氨基酸有很强的荧光性质,检测灵敏度可以达到1?10-9mol。 末端基氨基酸测定 ? 丹磺酰氯法 2021/2/11 * 18.2.2.3 Edman 降解 Edman氨基酸顺序分析法 Edman (苯异硫氰酸酯法)氨基酸顺序分析法实际上也是一种N-端分析法。此法的特点是能够不断重复循环,将肽链N-端氨基酸残基逐一进行标记和解离。 2021/2/11 * 18.2.2.4 C-端氨基酸的测定 羧肽酶是一种肽链外切酶,它能从多肽链的C-端逐个的水解。根据不同的反应时间测出酶水解所释放出的氨基酸种类和数量,从而知道蛋白质的C-末端残基顺序。 目前常用的羧肽酶有四种:A,B,C和Y;A和B来自胰脏;C来自柑桔叶;Y来自面包酵母。 羧肽酶A能水解除Pro,Arg和Lys以外的所有C-末端氨基酸残基;B只能水解Arg和Lys为C-末端残基的肽键。 羧肽酶法 2021/2/11 * 18.2.2.5 多肽的选择水解 SangerF及其他工作者花了约10年时间于己于1953年首先测定出牛胰岛素的氨基酸顺序,并且于1958年获得诺贝尔化学奖. 2021/2/11 * 18.2.3 多肽和蛋白质的合成 天冬氨酸 + 苯丙氨酸 天冬-天冬 +苯丙-苯丙 +
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