分子生物学基础知识.ppt

2021/3/14 * 增色效应 (hyperchromic effect) 由于DNA变性引起的光吸收增加称增色效应,也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。 DNA 分子中碱基间电子的相互作用是紫外吸收的结构基础, 但双螺旋结构有序堆积的碱基又 “ 束缚 ” 了这种作用。变性DNA的双链解开,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。 2021/3/14 * 4、复性:变性的DNA在适当的温度、一定离子强度条件下,给以足够的时间重新缔合形成双螺旋的过程,称为复性。 5、影响复性的因素: ① T:Tm － 20～26℃ ② 离子强度:降低带同种电荷单链间的排斥 ③ DNA浓度 ④ DNA复杂程度 6、分子杂交:不同来源的具有互补序列的两条核酸单链,在一定条件下可以按碱基互补原则形成双链的过程。 2021/3/14 * 六、遗传中心法则 转录 翻译 DNA RNA 蛋白质 逆转录 基因 表型 控制 2021/3/14 * 基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。 基因表达(gene expression) translation DNA mRNA protein transcription DNA RNA transcription DNA无组织特异性 基因表达有组织特异性 2021/3/14 * 核酸生物合成的一般规律 1 按照碱基互补配对原则,以DNA为模板,逆转录以RNA为模板 2 5’ → 3’方向,通过磷酸二酯键连接 3 特异的聚合酶催化 4 聚合酶的底物核苷酸要求是5’核糖或脱氧核糖 5 RNA聚合酶进行聚合反应时,可从头合成RNA DNA聚合酶进行聚合反应时,要有3’-OH末端 2021/3/14 * (一) DNA的复制 复制(replication) 是指遗传物质的传代,以亲代DNA为模板,以dNTP为原料,按照碱基互补原则合成子链DNA的过程。 2021/3/14 * 15N链 14N链 重氮环境15N 轻氮环境14N 2021/3/14 * 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 2021/3/14 * 1、复制的方式: 母链双螺旋解链,以母链的两条单链为模板,半保留复制 以四种dNTP为原料 碱基互补配对规律 子代DNA双链与母链碱基序列一致 5’ → 3’方向,通过磷酸二酯键连接 2021/3/14 * 2、复制的条件: substrate: dATP, dGTP, dCTP, dTTP template : 解开成单链的DNA母链模板 primer: 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 enzyme: a、DNA聚合酶 b、DNA连接酶 c、引物酶 d、解螺旋酶和拓扑异构酶 2021/3/14 * (三) 转录 转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 mRNA把遗传信息从染色体内贮存的状态转送至胞质,作为蛋白质合成的直接模板。 转录 RNA DNA 2021/3/14 * 七、氨基酸 蛋白质是生物功能的主要载体,而氨基酸是蛋白质的构件分子。自然界存在的成千上万种蛋白质,在结构和功能上的惊人的多样性主要由氨基酸的内在性质造成的。 2021/3/14 * (一) 氨基酸的分类: 生物体中发现的氨基酸180多种,大多数是不参加蛋白质组成,这些称为非蛋白质氨基酸。 蛋白质组成的常见氨基酸或称基本氨基酸只有20种,称为蛋白质氨基酸。 存在某些蛋白质的不常见氨基酸都是肽链上由常见氨基酸修饰转化而来。 2021/3/14 * 常见的蛋白质氨基酸 苏氨酸 Threonine Thr T 半胱氨酸 Cystine Cys C 蛋氨酸 Methionine Met M 天冬酰胺 Asparagine Asn N 谷氨酰胺 Glutarnine Gln Q 天冬氨酸 Asparticacid Asp D 谷氨酸 Glutamicacid Glu E 赖氨酸 Lysine Lys K 精氨酸 Arginine Arg R 组氨酸 Histidine His H 中文名称 英文名称 三字母缩写 单字母符号 甘氨酸 Glycine Gly G 丙氨酸 Alanine Ala A 缬氨酸 Valine Val V 亮氨酸 Leucine Leu L 异亮氨酸