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分子生物学实验常用培养基的配制 作者: 來源：点击次数：3516发布时间1、 Ampic订lin （lOOmg/ml） □组份浓度 100mg/ml Ampici Ilin □配制量50mL □配置方法 称量5g Ampicillin置于50inL离心管中。 加入40讥灭菌水，充分混合溶解后，定容至SOinLo 用0. 22 u m滤膜过滤除菌。 小份分装（lmL/份）后,-20°C保存。 2、 IPTG （24mg/mL） □组份浓度24mg/mL IPTG □配制量50inL □配置方法 称量1. 2g IPTG置于50mL离心管中。 加入401】丄灭菌水，充分混合溶解后，运容至50mLo 用0. 22 u m滤膜过滤除菌。 小份分装（1讥/份）后，-20°C保存。 3、 X- Gal （20mg/mL） □组份浓度 20mg/mL X- Gal □配制量50mL □配置方法 称取lg X-Gal置于50mL离心管中。 加入40mL DMF （二甲皋甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50讥。 小份分装（ImL/份）后，-20°C保存。 4、LB培养基 □组份浓度 1% (W/V) Tryptone, 0.5% (W/V) Yeast Extract, 1% (W/V) NaCl □配制量IL □配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯屮 Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl lOg 加入约BOOmL的去离子水，充分搅拌溶解? 滴加 5N NaOH (约 0. 2mL),调节 pH 值至 7. 0。 高温高压灭菌后，4°C保存。 LB/Amp培养基 □组份浓度 1% (W/V) Tryptone 0. 5% (W/V) Yeast Extract 1% (W/V) NaCl 0. lmg/mL AmpiciIlin □配制量IL □配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯屮 Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl lOg 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 滴加5N NaOH (约0. 2mL),调节pH值至7?0。 加去离子水将培养基定容至lLo 高温高压灭菌后，冷却至室温。 加入 ImL Ampicillin (lOOmg/mL)后均匀混合。 4°C保存。 6、TB培养基 □组份浓度 1.2% (W/V) Tryptone 4% (W/V) Yeast Extract 0.4% (V/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPO4 □配制量IL □配置方法1.配制磷酸盐缓冲液(0. 17M KH2PO4, 0. 72M K2HP04) lOOmLo 称取下列试剂，置于山烧杯屮。 Tryptone 12g Yeast Extract 24g Glycerol 4inL 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 加去离子水将培养基泄容至1L后,高温高丿玉灭菌。 待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液。 4C保存。 TB/Apm培养基 □组份浓度 1.2% (W/V) Tryptone 2.4% (W/V) Yeast Extract 0.4% (V/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPO4 0. lmg/mL Ampicillin □配制量IL □配置方法1.配制磷酸盐缓冲液(0. 17M KH2PO4, 0. 72M K2HP04) lOOmLc溶解2?31g KH2P04 和2. 54g K2HP04于90mL的去离子水中,搅拌溶解后，加去离子水定容至lOOmL,高温高压灭菌。 称取下列试剂,置于1L烧杯中。 Tryptone 12g Yeast Extract 24g Glycerol 4mL 加入约SOOmL的去离子水，充分搅拌溶解。 加去离子水将培养基定容至1L后,高温高床灭菌。 待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液和ln】L Ampicillin (100mg/mL) 0 均匀混合后4°C保存。 8、SOB培养基 □组份浓度 2% (W/V) Tryptone 0.5% (W/V) Yeast Extract 0. 05% (W /V) NaCl 5mM KC1 lOmM MgC12 □配制量IL □配置方法1.配制250mM KC1溶液。 在90mL的去离子水中溶解1. 86g KC1后,定容至lOOmLo 配制2M MgC12溶液。 在90mL的去离子水中溶解19g MgC12后,定容至lOOmL,高温高压灭菌。 3 .称取下列试剂，置于1L烧杯中。 Tryptone 20g Yeast Extract 5g NaCl