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选修1专题2课题3分解纤维素的微生物的分离（学案） 【学习目标】 纤维素酶的种类及作用 从土壤中分离出分解纤维素的微生物 【知识梳理】 一、 基础知识 1 .纤维素 含 三种元素，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是 ，人体内没有 ，所以人体 不能直接以纤维素为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成 释放到无 机环境。 C、H、O 葡萄糖 纤维素酶 葡萄糖 纤维素酶 纤维素酶是一种 酶，一般认为它至少包括三种组分，即 _、 和 ，前两种酶使纤维素分 解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。 复合 C酶C x酶葡萄糖苷酶 纤维二糖 纤维素分解菌的筛选 方法： 染色法，通过颜色反应筛选。刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被纤维素酶分解 后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的 ，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维 素分解菌。 刚果红红色复合物 透明圈 例题1:植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问题： （1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由 3种组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。 ⑵在含纤维素的培养基中加入刚果红 （CR）染料时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有 CR的该 种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 纤维二糖葡萄糖红透明圈 二、 实验设计 实验流程 土壤取样：富含 的环境 纤维素 选择培养：用 培养，以增加纤维素分解菌的浓度 选择培养基 梯度稀释：制备系列稀释液 涂布平板：将样品涂布到鉴别 的培养基上 纤维素分解菌 挑选产生 的菌落 透明圈 〖思考1〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？ 课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上；本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴 别培养基上。其它操作基本相同。 〖思考2〗 取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？ 选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。 生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获 得目的微生物的几率要高于普通环境。 〖思考3〗将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约 10cm的腐殖土壤中。 〖思考4〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养 条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 例题2:某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。 如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题： 劇慟秸玮I靦理、水解，両 发％ 需 农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素可以经过纤维素分解菌分解成葡萄糖。人们常常从土壤中分离纤维 素分解菌。筛选纤维素分解菌常用的方法是 。其实验流程是：土壤取样T选择培养T T将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上T挑选产生 的菌落。 刚果红染色法 梯度稀释透明圈 【课前热身】 鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色，加入刚果红的操作可在（ ） 制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时④涂布时 ⑤培养基上长出菌落时 ①③ B .②⑤ C .③⑤ D .④⑤ 【答案】C 【解析】加入刚果红的操作有两种：先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应，⑤正确；在倒平板时就加 入刚果红，③正确。 以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是（ ） 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 选择培养这一步可省略，但得到的纤维素分解菌会较少 可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量 对照组可用等量的纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上 【答案】A 【解析】经选择培养后，经梯度稀释后，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上， A错误；选择培 养可省略，但培养分离的纤维素分解菌少， B正确；纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等 纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定， C正确；实验组和对照组遵循单一变量原则，对照组可用等量的 纤维素分解菌培养液涂布到不含纤维素的培养基上，设置对照能证明经“浓缩”培养的确得到了欲分离的 微生物，D正确。 下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是（ ） 土壤取样 称取10g 土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 吸取0. 1 mL进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度 ①t②t③t④ ①t③t②t④ ①t②t④t③ ①t④t②t③ 【答案】C 【解析】从土壤中