医学微生物学实验课件：3细菌感染的实验室诊断及粪便分离.pdf

实验三 粪便标本分离-I 抗酸染色 内容： 1、录像：细菌感染的检查方法 2 、小讲课：细菌分离鉴定 3 、操作：粪便标本划线接种麦康凯平板 4 、操作/示教：抗酸染色 5 、操作：正常菌群/环境菌革兰染色 视频：细菌感染的检查方法 细菌分离鉴定  细菌学诊断核心内容: Koch’s Postulates  通过检测特定致病细菌的存在，结合流行病学 数据和临床观察，对疾病的病原学诊断提供支 持  通过对致病细菌毒力、药敏、变异等性质的分 析，对疾病的治疗、预防、流行控制等提供支 持 细菌学诊断基本流程 临床标本 涂片 快速诊 预处理 增 菌 染色 断试验 初步诊 接种培养基，分离单菌落纯培养 断报告 各种鉴定试验 涂片染色 生化试验 血清学实验 动物试验 药敏试验 最终诊断报告 Successful culture and characterization is usually the gold standard for diagnosis of bacterial infection, but it takes time. 粪便标本 （一）目的 对粪便标本的检验有助于评估病人排 泄功能及准确评估疾病。 1、常规标本 用于检查粪便的性状、颜色、混合物 及寄生虫等。 2、隐血标本 用于检查粪便内肉眼不能观察到的微 量血液。 3、寄生虫及虫卵标本 用于检查寄生虫成虫、幼虫 及虫卵。 4、培养标本 用于检查粪便中的致病菌。 粪便标本 （二）用物 蜡纸盒或容器（如小瓶、塑料 盒或便器）、竹签。培养标本备无菌培 养管或无菌蜡纸盒和无菌长棉签、竹签 （三）方法：操作前必要时用屏风或床帘 遮挡病人… 粪便标本分离培养实验 粪便标本采取、保存（甘油 保存液）、送检 I. 分离培养 分区划线接种麦康凯平板 革兰染色 II. 纯培养 肉汤接种（增菌） III. 纯培养 药敏试验 接种生化反应条 IV. 结果观察 氧化酶试验 实验报告 麦康凯琼脂 MacConkey Agar  蛋白胨 2% C/N源  NaCl 0.5% 变形杆菌动力（波浪生长）必须  乳糖 1% C源，致病肠道菌多不发酵或慢发酵乳糖  牛胆盐 0.5% 抑制非肠道菌和部分G+菌，酸性条件析 出不溶性胆酸沉淀  中性红 pH 6.8=8.0, 红=黄（与酚红相反）  结晶紫 抑制Staphylococcus, Enterococcus 山梨糖醇取代乳糖 →Sorbitol MacConkey Agar 鉴定E. coli O157:H7 (Sorbitol non-fermenter) 麦康凯琼脂 MacConkey Agar 操作：粪便标本分区划线培养 用棉签取混匀标本，稍沥干，在麦康凯平板上划第I区（涂一 至两小道