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实验七细菌接合实验
学生讨论课-III
1、操作:细菌接合实验
2 、视频:病毒的分离与鉴定
3 、讨论课6 :鲍特菌
4 、讨论课7 :军团菌
5 、讨论课8 :假单胞菌
细菌接合Bacterial Conjugation
细菌遗传信息水平传播途径—— 接合、转
化、转导
接合必要条件—— 仅供体方具有接合性质
粒编码蛋白组成的性菌毛
接合过程—— 性菌毛介导供、受体细胞靠
近,进而通过细胞膜融合形成接合桥,单链
DNA 5’端通过接合桥进入受体,复制/重组
细菌接合Bacterial Conjugation
细菌接合Bacterial Conjugation
细菌接合传递的遗传物质
接合性质粒:F质粒,R质粒…
可诱动传递质粒:ColE1…需接合性质粒反式
互补提供性菌毛编码功能
细菌染色体序列:需整合有接合性质粒(hfr)
跨种属接合—— 细菌抗药性水平传播
跨界接合 —— 植物冠瘿病、毛根病
(细菌DNA整合入植物基因组)
细菌接合实验
实验材料: (三人一组)
菌 株:
供体菌 鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药株S. m. CmR+
受体菌 大肠埃希菌氯霉素敏感株E. c. CmR-
培养基 1 ml 肉汤管3支
含氯霉素 麦康凯平板3块
无氯霉素 麦康凯平板1块
其它器材: 100 l 加样器
无菌加样枪头
细菌接合实验
供体菌 鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药株S. m. CmR+
受体菌 大肠埃希菌氯霉素敏感株E. c. CmR-
供体菌 受体菌
0.1ml 0.1ml
1ml肉汤 1ml肉汤 1ml肉汤
37℃温箱1-2小时培养
含氯霉素 含氯霉素 含氯霉素 无氯霉素
麦康凯培养基 麦康凯培养基 麦康凯培养基 麦康凯培养基
麦康凯平板
沙门菌 大肠埃希菌
细菌接合实验
37摄氏度过夜培养后
S. m. S. m. + E. c. E. c. E. c.
Cm Cm Cm Cm-free
MacConkey MacConkey MacConkey MacConkey
无色透明菌落 无色透明菌落和粉 无菌落生长 粉红色不
红色不透明菌落 透明菌落
鲍特菌属Bordetella
-
G coccobacillus (H. i.-like)
B. pertussis
• Strictly aerobic, X/V factor independent, slow growth, capsulated
• Reversible phenotypic change (phase variation):
fresh virulent isolate
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