菊花的组织培养.pptxVIP

通过初中的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ ;扦插;愈伤组织;思考;已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。;一、植物组织培养的理论基础（课本P32） 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。;1、培育无病毒植株;菊花的组织培养;什么叫细胞分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 什么叫脱（去）分化、再分化？ 如何控制细胞的脱分化与去分化？ ;愈伤组织;三、掌握几个概念 外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段. 细胞分化： 植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生 理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异 的过程叫做细胞分化。 愈伤组织：离体的植物组织或细胞，培养一段时间后，会通 过细胞有丝分裂，形成愈伤组织。 愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 脱分化（去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤 组织的过程，称为植物细胞的脱分化或 者叫做去分化。 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新 分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。;二、植物组织培养的基本过程;影响植物组织培养的因素 1、外植体的影响 1）不同的植物组织培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。 2)同一种材料，材料的年龄，保存时间也有影响。幼龄、保存时间短的材料容易培养成功。 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，因为这种嫩枝生理状态良好，易诱导脱分化和再分化。;2、营养因素的影响： MS培养基主要成分包括： 大量元素N、P、S、K、Ca、Mg等 无机物 微量元素Fe、Mn、B、Zn、Mo、 Cu、Co、I等 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激???：生长素、细胞分裂素、赤霉素等;讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？（P83、84）;3、激素的影响 在配置好的MS培养基中，常常需要添加植物激素，最常用的是生长素和细胞分裂素。它们是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 生长素的作用：促进细胞伸长。 细胞分裂素的作用：促进细胞的分裂、生长和发育。 1)按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。;2)当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 （课本P33）;4、消毒和灭菌对植物组织培养的影响 如外植体的消毒、器械的灭菌不彻底会导致整个实验前功尽弃。 5、其它因素的影响 PH 5.8左右 温度 18~22℃ 光照 一般前14d进行暗培养，形成愈伤组织后进行光照，因为叶片中的叶绿素只有在有光照的条件下才能形成，一般光照12h/d。;植物组织培养过程:;影响植物组织培养的因素;五、实验操作 1、植物组织培养的操作流程 制备MS固体培养基 外植体的消毒 接种 培养 移栽 栽培 ; 2、各步具体操作及注意事项 （1）MS固体培养基的配制 1）配制各种母液（为什么？） ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量 ;2）配制培养基 ① 配制培养液 ② 调PH ③ 培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml，由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素 3）灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 ;1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝;注意事项： 1.在消毒过程中