临床生物化学：第七章 代谢物酶法分析.pptVIP

表10-2 常用试剂酶的理化特征及质量要求 名称 来源 分子量 等电点 比活性 (U/mg) 杂酶占试剂酶活性的%（允许限度） 葡萄糖氧化酶（GOD） A.niger p.notatum 186000 152000 4.30 ＞20 蔗糖酶含量＜0.01%,过氧化氢酶＜10U/mg蛋白 己糖激酶(HK) 酵母 105000 4.50-4.80 ＞140 磷酸葡萄糖异构酶＜0.01%,G-6-P脱氢酶＜0.01% 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH) 酵母 212000 4.50 ＞140 己糖激酶、磷酸葡萄糖异构酶＜0.02% 过氧化物酶(POD) 辣根 40200 7.20 ＞50 不含胺氧化酶及过氧化氢酶 名称 来源 分子量 等电点 比活性 (U/mg) 杂酶占试剂酶活性的%（允许限度） 脲酶 巨豆 483 000 4.90 5-100 天冬氨酸酶≤0.02%,精氨酸酶≤0.002%, NH4+≤0.0005μg/U, 谷氨酸脱氢酶(GLDH) 变形杆菌 300 000 4.60 ≥90 醇脱氢酶、乳酶脱氢酶、苹果酸脱氢酶＜0.01% 乳酸脱氢酶 心 135 000 4.5-4.8 ≥500 丙氨酸转氨酶＜0.01%,丙酮酸激酶、醛缩酶＜0.001% 脂蛋白脂肪酶（LPL） 心，假单胞菌属 47 000 5.95± 0.05 ＞100 ATP酶＜0.00008%, NADH氧化酶＜0.001%,胆固醇氧化酶＜0.002%,过氧化氢酶＜0.02% 甘油激酶（GK) 嗜热脂肪芽胞杆菌 209 000 ? ≥85 NADH氧化酶＜0.01%,己糖激酶＜0.02% 名称 来源 分子量 等电点 比活性 (U/mg) 杂酶占试剂酶活性的% （允许限度） 磷酸-3-甘油氧化酶 足球菌 76 000 4.6±0.1 ＞40 乳酸氧化酶≤0.001% 胆固醇酯酶(CEH) 假单胞菌 302000 ? ＞25 ATP酶＜0.00008, NADH氧化酶＜0.001%,GOD＜0.00001%,尿酸酶＜0.00004%,过氧化氢酶＜1U/mg 胆固醇氧化酶(CHOD) 链霉菌 34000 5.1-5.4 ＞25 CEH＜0.005%,GOD＜0.00014%尿酸酶＜0.0004% 胆红素氧化酶(BOD) 疣胞漆斑菌 52000 4.10 ＞0.2 NADH氧化酶＜0.0007% 尿酸酶 肝 100000 6.30 ≥15 过氧化氢酶＜1.0% 丙酮酸氧化酶 ? 260000 4.30 ≥1.5 ATP酶≤0.05% ，ALT、AST≤0.05% 酶法分析是以酶为主要试剂测定酶促反应的底物、辅酶、辅基、激活剂或抑制剂，以及酶偶联法测定酶活性等的一类方法。代谢物酶法分析技术是指用酶法分析的方法来测定人体內的代谢物或代谢产物的技术。分为平衡法和速率法。平衡法是指标本中待测物经过酶促指示反应信号达到平衡，测定底物的总变化量，即测定的是“浓度”。该法的关键是要确定好达到平衡所需的时间 小结与展望 代谢物酶法分析技术可以分为：单酶反应直接法、酶促偶联法、酶循环法、酶激活剂和抑制剂测定法等。最常用的偶联指示系统有脱氢酶和过氧化物酶指示系统。代谢物酶法分析具有许多优点，但测定的影响困素也不少，因此，在方法设计中要注意试剂酶的特异性和纯度，要注意干扰的避免和灵敏度的提高，速率法和平衡法的应用要适当等 小结与展望 秋色 病例分析 病例1 【病史】患者，男，53岁，因心悸胸闷7天入院。活动后气短，并有下肢水肿。体格检查：体温36.8℃，脉搏110次/分，呼吸频率28次/分，血压100/60mmHg，急性痛苦病容。 【实验室检查】CK-MB 160U/L，心电图示Ⅱ、Ⅲ、αVF导联出现坏死性Q波、ST段呈弓背向上抬高，肌钙蛋白22.8ng/ml，NT-proBNP1620pg/ml。 【临床诊断】急性心肌梗死。 【诊断依据】心肌酶、肌钙蛋白结果提示急性心肌梗死，心电图结果也支持；NT-proBNP结果反映出患者由于心肌梗死，表现出心力衰竭。 病例2 【病史】 某男性患者，于2小时前搬重物时突然感到胸骨后出现压榨性疼痛，休息与口含硝酸甘油均不能缓解，伴大汗、恶心，呕吐过2次，为胃内容物，大小便正常，既往无高血压和心绞痛病史，无药物过敏史。体格检查：基本体征正常，急性痛苦病容，平卧位，无皮疹和发绀，浅表淋巴结未触及，巩膜不黄，颈软，颈静脉无怒张，心界不大，有期前收缩5~6次/分，心尖部有S4，肺清无啰音，下肢不肿。心电图示：STV1-5升高，QRSV1~5呈Qr型，T波倒置和室性期前收缩。 【实验室检查】Mb:80μg/L，CK-MB mass:10μg/L，cTnI:0.2μg/L；行溶栓治疗后，Mb:323μg/L，CK-MB mass:69