生物化学第一章 蛋白质的结构与功能.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蛋白质的理化性质 第四节 * The Physical and Chemical Characters of Protein 一、蛋白质的两性解离  * 蛋白质分子在一定的溶液pH条件下可解离成带负电荷或正电荷的基团。 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 利用蛋白质两性电离的性质，可通过电泳、离子交换层析、等电聚焦等技术分离蛋白质。 二、蛋白质的胶体性质 * 蛋白质是高分子化合物 蛋白质胶体稳定性的因素： 颗粒表面水化膜 表面电荷 除去上述两个稳定因素时，蛋白质从溶液中析出。 * + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的沉淀 三、蛋白质的变性、复性 * 1.变性(denaturation) 蛋白质在某些理化因素的作用下，空间构象受到破坏，改变理化性质，并失去其生物活性，称为蛋白质的变性。 变性涉及空间结构的改变。一级结构不变，肽键无断裂。 * 蛋白质变性的因素 常见的有高温、高压、紫外线和乙醇等有机溶剂、重金属离子及生物碱试剂等。 在医学上，变性因素可导致病原微生物蛋白的变性失活，常被用来消毒灭菌。 * 2. 复性(renaturation) 当蛋白质变性程度较轻，消除变性因素使蛋白质恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性。 许多蛋白质或结构复杂或变性后空间构象严重破坏，不可能发生复性。 四、蛋白质的紫外吸收 * 蛋白质(色氨酸及酪氨酸)在紫外光波长280nm处有最大吸收，可以用于检测蛋白质含量。 五、蛋白质的呈色反应 * 某些试剂对蛋白质分子中肽键或特殊氨基酸残基发生显色反应，产生的有色物质与蛋白质浓度相关，可用于蛋白质定性、定量检测。如双缩脲反应，考马斯亮蓝、茚三酮反应等。 Thank you * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蛋白质的分子结构 一级结构 (primary structure) 二级结构 (secondary structure) 三级结构 (tertiary structure) 四级结构 (quaternary structure) * 高级结构 一、蛋白质的一级结构 氨基酸排列顺序称为蛋白质的一级结构。 一级结构是蛋白质分子的基本结构，是决定蛋白质空间构象的基础。蛋白质的空间构象则是实现其生物学功能的基础。 一级结构中的主要化学键是肽键。 * * 牛胰岛素的一级结构 二、蛋白质的空间结构 蛋白质在一级结构的基础上，分子单键旋转而盘曲、折叠形成特定空间构象。 蛋白质的构象包括主链构象和侧链构象。 蛋白质的空间结构包括蛋白质的二级结构、三级结构和四级结构。 * （一）蛋白质的二级结构 是指蛋白质分子中某一肽链的局部空间结构，即多肽链中主链原子的相对空间排列分布，而不涉及氨基酸残基侧链的空间排布。 稳定因素： 氢键 * * 肽单元 肽键具有部分双键性质，因此肽键不能自由旋转，而使涉及肽键的6个原子共处于同一平面，称为肽键平面，又称肽单元。 * 肽键平面示意图 * 2. 蛋白质二级结构的主要构象形式 α-螺旋(α-helix) β-折叠(β-pleated sheet) β-转角(β-turn) 无规卷曲(random coil) * α-螺旋结构 * （1）α-螺旋 多肽链中的主链围绕中心轴有规律的 螺旋式上升，螺旋的走向为顺时针方向， 称右手螺旋。 氢键是维持α-螺旋结构稳定的主要化学键。 * （2）β-折叠 β-折叠呈折纸状 多肽链充分伸展，各个肽单元以Cα为旋转 点，依次折叠成锯齿状结构，氨基酸残基侧链交替地位于锯齿状结构的上下方。 * β-折叠 * （3）β-转角 出现于肽链进行180