HPLC谱图常见问题原因汇总及解决方式.pdfVIP

HPLC 谱图常见问题原因及解决方式汇总 液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。 其中有一些问题可以通过改变设备 参数得到解决； 而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。 对于色谱柱和流动相的正确选 择是得到好的色谱图的关键所在。 A.峰拖尾 原因 解决办法 1．a.反冲色谱柱； 1.筛板阻塞； b.更换进口筛板； c.更换色谱柱； 2.色谱柱塌陷； 2. 填充色谱柱； 3. a.使用更长的色谱柱； 3.干扰峰； b.改变流动相或更换色谱柱； 4.调整 pH 值，对于碱性化合物， 低 4.流动相 pH 选择错误； pH 值更有利于得到对称峰； 5.样品与填料表面的溶化点发生 5.a.加入离子对试剂或碱性挥发性 反应； 修饰剂。 b.更改色谱柱。 B.峰前延 原因 解决办法 1.柱温低； 1.升高柱温； 2.样品溶剂选择不恰当； 2.使用流动相作为样品溶剂； 3.样品过载； 3.降低样品含量； 4.色谱柱损坏； 4.见 A1、A2 ； C.峰分叉 原因 解决办法 1.取下保护柱再进行分析；如果必要更换保护 柱；如果分析柱阻塞，拆下来清洗；如果问题仍然 1.保护柱或分析柱污 存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的 染； 再生措施；如果问题仍然存在，入口可能被阻塞， 更换筛板或更换色谱柱。 2.样品溶剂不溶于流 2. 改变样品溶剂；如果可能采取流动相作为样 动相； 品溶剂； D.峰变形 原因 解决办法 1.样品过载； 1.减少样品载量； E．早出的峰变形 原因 解决办法 1. a.减少进样体积； 1.样品溶剂选择不恰当； b.运用低极性样品溶剂； F．早出的峰拖尾程度大于晚出的峰 原因