KIA原理和使用方法.docxVIP

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(完满版)KIA原理和使用方法 (完满版)KIA原理和使用方法 (完满版)KIA原理和使用方法 克氏双糖铁琼脂 (KIA) 的原理和使用方法 一. KIA 常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力,只用 KIA 一种就可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌差异出 来。 KIA 成分中含有葡萄糖和乳糖,两者比率为 1: 10, 指示剂为酚红,其在 PH6.8 时变成黄色,而 KIA PH 为,产少量的酸即可以致颜色变化。  的 二.生化原理:斜面局部裸露于空气中,为有氧环境。而下部与空气间隔是相对厌氧的环境。因此配 KIA 时,最重要的是斜面局部和管下部琼脂的长度,两者均为 3cm ,以保证两局部相对应的有氧或厌氧环境。用针穿刺时,取单个菌落,穿刺至底部 3-5mm 处,尔后在斜面上往来划线。放 35 度培养 18-24 小时。 三.观察结果:有三各种类 非发酵型:无碳氢化合物发酵,因此无酸产生,斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质以致斜面变红。这种种类的细菌称为非发酵型。 B.非乳糖发酵型 : 若是接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌,培养基内仅有 0.1% 葡萄糖可以产酸。开始阶段, 培养 8-12h 时,产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里,葡萄糖被完满耗资,斜面局部 的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸,产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸;到 18-24h ,整个斜面又变换 成碱性 PH ,颜色有变成红色。深部〔厌氧地域〕,氨基酸降解缺乏以中和形成的酸,培养基仍为黄色。 乳糖发酵型

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