用于癌症样本miRNA测序定量结果评价的试剂、制备方法和应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 108707663 A (43)申请公布日 2018.10.26 (21)申请号 201810356012.6 (22)申请日 2018.04.19 (71)申请人 深圳华大基因股份有限公司 地址 518083 广东省深圳市盐田区洪安三 街21号华大综合园7栋7层-14层 (72)发明人 宗亮　丁芬　姚秋林　田志坚　 唐美芳　 (74)专利代理机构 深圳鼎合诚知识产权代理有 限公司 44281 代理人 李小焦　彭家恩 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) 权利要求书2页 说明书9页 序列表2页 附图5页 (54)发明名称 用于癌症样本miRNA测序定量结果评价的试 剂、制备方法和应用 (57)摘要 本申请公开了一种用于癌症样本miRNA测序 定量结果评价的试剂及其制备方法和应用。本申 请的试剂包括SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.8所示 序列的RNA中的至少一种。本申请的试剂，将其定 量的加入待测RNA样品中，并通过测序定量分析 所加入的试剂的量，将定量分析结果与实际加入 量进行比较，以此评价整个miRNA测序定量结果 的准确性和可靠性；该方法简便、易用，能够有效 的评价miRNA测序定量结果的可信度。本申请的 试剂各方面特性都与真实的miRNA十分接近，因 此，采用本申请的试剂能够更真实、准确、可靠的 A 反映人源miRNA测序定量结果的实际情况，从而 3 对癌症样本miRNA测序定量结果作出更准确、可 6 6 7 靠的评价。 0 7 8 0 1 N C CN 108707663 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种用于癌症样本miRNA测序定量结果评价的试剂，其特征在于：所述试剂包括SEQ  ID NO.1至SEQ  ID NO.8所示序列的RNA中的至少一种； SEQ  ID NO.1：5’-GAGCCAUGCAUUAUAUGCCAG-3’ SEQ  ID NO.2：5’-UAUGCCAGAAGUCUCACGGCC-3’ SEQ  ID NO.3：5’-CCUAACGUGCCUAUGCGCAGAA-3’ SEQ  ID NO.4：5’-UGCGCAGACAUAAAAGCGAU-3’ SEQ  ID NO.5：5’-AAGCGAUUACGACAUUAGGAU-3’ SEQ  ID NO.6：5’-AUGUGAAUGACCGGUACCCA-3’ SEQ  ID NO.7：5’-GUACCCAUGUGAAGAUCGCGCU-3’ SEQ  ID NO.8：5’-UAUUGAUCGCGCUGAGCCAUG-3’。 2.根据权利要求1所述的试剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤， (1)从miRNA公共数据库中导出人源miRNA的所有序列，统计其长度分布和GC％分布； (2)随机生成一系列设定长度的RNA短序列，并从随机生成的RNA短序列中筛选出长度 分布和GC％分布分别落在步骤(1)统计的长度分布和GC％分布统计值上下四分位数间的 RNA序列，作为第一短序列集合； (3)将所述第一短序列集合中的所有RNA序列分别与人类基因组和miRNA公共数据库进 行比对，将能够比对匹