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专题2 微生物的培养与应用 课题1微生物的实验室培养 【学习目标】 1.了解有关培养基的基础知识， 2.能进行无菌技术的操作和微生物的培养。 【学习过程】 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。可分为液体培养基和 培养基。 2．营养构成：各种培养基一般都含有水、 、 和无机盐，此外还要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术 (一)获得纯净培养物的关键是防止外来 的人侵，具体操作如下： 1．对实验操作的 、操作者的 和 进行清洁和消毒。 2．将用于微生物培养的 、接种用具和培养基等器具进行 。 3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。 4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 (二)消毒和灭菌 1．消毒是指使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。常用的方法有 消毒法和 消毒法。 2．灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物。常用的方法有： 灭菌、 灭菌、 灭菌。 三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 步骤：计算→称量→溶化→ →倒平板。 四、纯化大肠杆菌 微生物接种最常用的是 划线法和 涂布平板法。 1．平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续 的操作，将聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面。 2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度 ，然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【典例精析】 【例1】下列关于微生物营养的说法，正确的是……………………………………( ) A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量 c．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量 【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌………( ) A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针 C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅 【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是………………………( ) A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置 【巩固练习】 1．下列有关培养基的叙述正确的是……( ) A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( ) A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素 C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素 3．获得纯净培养物的关键是……………( ) A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B．接种纯种细菌 C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵 4．下列常用的无菌操作中错误的是……( ) 用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源 C．实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭 5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板 6．有关倒平板的操作错误的是…………( ) A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰