分析化学课件吸光光度法.pptVIP

紫外-可见分光光度计组件 光源 单色器 吸收池 检测系统 信号显示系统 氢灯，氘灯，185 ~ 375 nm； 钨灯，360 ~ 2500 nm. 基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定 作用：将复合光色散成单色光 棱镜 光栅 玻璃， 360 ~ 3200 nm, 石英，200 ~ 4000 nm 平面透射光栅， 反射光栅 玻璃，光学玻璃，石英。玻璃比色皿——可见光区 石英比色皿——可见光区、紫外光区 作用：接收透射光，将光信号转换为电信号，并放大 光电管，光电倍增管，光电二极管，光导摄像管（多道分析器） 表头、记录仪、屏幕、数字显示 第三十一页，共60页 常用光源 光源 波长范围(nm) 适用于 氢灯 185~375 紫外 氘灯 185~400 紫外 钨灯 360~2500 可见，近红外 卤钨灯 250~2000 紫外，可见，近红外 氙灯 180~1000 紫外、可见（荧光） 能斯特灯 1000~3500 红外 空心阴极灯 特有 原子光谱 激光光源 特有 各种谱学手段 第三十二页，共60页 第三节 显色反应及其影响因素 一、显色反应的类型及要求 广义，有吸收 对显色反应或显色剂的要求： [定义]显色反应：将被测组分转变为“有色物质”的反应 ⅰ 选择性好（最好是特效反应） ⅲ 对比度要大，(??max)最大吸收波长相差60nm以上 ⅴ 显色反应的条件要易于控制 ⅱ 灵敏度高（ ?max ﹥104L?mol-1?cm-1） ⅳ MR稳定，组成恒定 M无色 + R = MR有色(主要是络合反应、氧化还原反应） 第三十三页，共60页 lmax 对比度(Δlmax)：络合物最大吸收波长(lMRmax)与试剂 最大吸收波(lRmax)之差 Δl 第三十四页，共60页 络合反应 氧化还原反应 显色反应类型 第三十五页，共60页 在分析化学中应用较多的是有机显色剂。 二、无机离子的常用显色剂 无机显色剂: 过氧化氢，硫氰酸盐，氨水和钼酸铵等。 无机显色剂在光度分析中应用不多，这主要是因为生成的络合物稳定性差，灵敏度和选择性都不高。 有机显色剂与金属离子能形成稳定的、具有特征颜色的螯合物，其灵敏度和选择性都较高。 有机显色剂： [定义]显色剂：能与被测组分反应生成有色物质的试剂 第三十六页，共60页 三、影响显色反应的因素 1 1 1 1 2 3 4 5 6 6 1.溶液的酸度：[H+]一切反应的基础 a.影响M的存在状态， [H+] ↘，M会水解； b.影响[R]及颜色，[H+] ↗，影响[R]（大多有机弱酸） 影响颜色（大多酸碱指示剂） c.影响MRn组成 第三十七页，共60页 显色反应酸度由实验测得： 例如：铁（Ⅲ）与水杨酸的显色反应： pH4时，生成1?1紫色络合物Fe(ssal)+; pH=4～9时，生成1?2红色络合物Fe(ssal)2-; pH9时，生成1?3黄色络合物Fe(ssal)33-。 pH 曲线中平坦部分所对应的pH范围即为显色反应适宜的酸度范围。 第三十八页，共60页 2.显色剂的用量（CR） 为使显色反应完全，一般R过量（同离子效应），但R也不能大过头，否则，物极必反（盐效应）。 a. R本身有色，空白↗ b. 改变络合比，无法定量。例：Mo(Ⅴ)与SCN-: CR由实验确定 第三十九页，共60页 3. 时间t A t t 由实验确定。显色后，至少应保持到测定工作做完。 第四十页，共60页 4.温度T 大多显色反应在室温下进行，但也有需要加热才能完成的。 V=f(T) T↗, V↗。但T 太↗，有色物分解。 合适的T 由实验确定。 5.溶剂和表面活性剂 溶剂影响有色络合物的离解度 溶剂影响有色络合物的显色速度 溶剂影响有色络合物的颜色 表面活性剂 胶束增溶 形成三元络合物 第四十一页，共60页 6. 干扰及消除 a.干扰 干扰物本身有色或与显色剂显色，+干扰 干扰物与M、N反应，使显色不完全，-干扰 b. 消除 控制酸度，使M显色，干扰不显色 氧化还原，改变干扰离子价态 掩蔽 校正系数 参比液：可消除显色剂和某些离子的干扰 选择?测，可避开干扰的吸收 增加显色剂用量 分离 第四十二页，共60页 第四节 光度法的测量及误差控制 一.测量波长?的选择 (1)“最大吸收”原则—无干扰， 选择 ?max为测量波长 (2)“吸收较大，干扰最小”原则—有干扰，选择不受干扰的次强吸收波长为测量波长 A ? A