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实验三种子发芽测定 一、目的要求 要求掌握种子发芽测定的操作技术，并学会计算种子发芽的各种质量指标。 二、材料器具 1．材料柠条种子。 2．器具及药品恒温箱、培养皿、滤纸、镊子、温度计（ 0～100℃）、取样匙、直 尺、量筒、烧杯、高锰酸钾、标签、蒸馏水、洗瓶、解剖刀、解剖针等。 三、方法步骤 1．测定样品的提取发芽测定所需样品从净度测定选出的纯净种子中提取。用四分 法将种子分成 4 份，从每份中随机提取 25 粒种子组成 100 粒。共取 4 个 100 粒，即成 为 4 次重复。种粒大的可以 50 粒或 25 粒为一次重复，样品数量有限或设备条件不足时， 也可以采用 3 次重复，但应在检验证中注明。 2．消毒灭菌为了预防霉菌感染，干扰检验结果，检验所使用的种子和各种对象一 般都要经过消毒灭菌处理。 ①检验用具的消毒灭茵：培养皿、纱布、小镊子仔细洗净，并用沸水煮 5～ 10min。 ②种子的消毒灭菌：目前常用的有福尔马林、高锰酸钾、升汞、过氧化氢等。药剂 种类不同，处理的方法和时间也不一致。种子用 0.2～0.5%的高锰酸钾溶液浸 2h，取出 用清水冲洗数次。 3．测定样品的预处理 刺槐种子可加入沸水不断搅拌至水凉或用锐利的解剖针或小刀等仔细地从胚根后 面弄破种皮，然后用室温水浸种 24h，浸种过程中更换 1～2 次水。 4．置床将经过消毒灭菌、浸种的种子安放到发芽床上。视树种而不同，常用的发 芽床有纱布、滤纸或细砂。一般中粒、小粒种可在培养皿中放上纱布或滤纸作床。本次 实验均以滤纸为发芽床。 在每个培养皿床上整齐地安放 100 粒种子（种粒较大的可为 50 粒乃至 25 粒），种 粒之同保持的距离大约相当于种粒本身的 1～4 倍，以减少霉菌蔓延感染，并避免发芽 的幼根相互纠缠。种粒的排放应有一定规则，以便计数并减少错误。 在培养皿不易磨损的地方（例如底盘的外缘）贴上小标签，写明送检样品号、重复 号、姓名和置床日，以免错乱。然后将培养皿盖好放入指定的恒温箱内。恒温箱定期进 行臭氧消毒。根据树种的特性使用变温或恒温，柠条和胡枝子种子适宜的发芽温度为 20～30℃。规定使用变温的，每昼夜应当保持低温 16h，高温 8h，温度的变换应在 3h 以内逐渐完成。湿度为 60～70%。 5．发芽测定的管理 （1）经常检查发芽环境的温度，仪器的温度同预定的温度相差不能超过± 1℃。 （2 ）保持发芽床的水分水分不足时应及时加水。但水分也不能过多，用指尖轻压 发芽床（指纸床），如指尖周围出现水膜，或者种粒四周出现水膜，都表示水分过多。 （3 ）通气种子发芽需要足够的氧气，并会释放出大量的二气化碳。有盖的培养皿 的缺点之一就是通气不良，应当经常揭开盖子充分换气。 （4 ）将轻微感染霉菌的种子取出（不要使它们触及健康的种粒），用清水冲洗数 次，直到水无混浊再放回发芽床。发霉严重时整个滤纸，甚至整个培养皿都要更换。这 些情况在发芽记录表中应有记录。 6．观察记载 （1）发芽测定的情况要定期观察并按表内容记载。为了更好地掌握发芽测定的全 过程，本实验最好要求每天作一次观察记载。尤其是统计发芽势和发芽率的那一天，必 须有记载。记载时拣出正常发芽粒、腐坏粒和异状发芽粒。 （2 ）发芽测定的持续时间刺槐种子发芽测定的持续天数为 14d，以置床之日为零起 算，且不包括种子预处理的时间。如果确认某样品已经达到最高发芽率，也可在规定的 时间以前结束测定。 如到规定的结束时间仍有较多的种粒萌发， 也可酌情延长测定时间。 发芽测定所用的实际天数应在检验报告中填明。 （3 ）记载项目按发芽床的编号依次记载以下各项内容。