高中生物选修三基因工程的基本操作程序.pptVIP

高中生物选修三基因工程的基本操作程序;补充: 1.原核细胞基因结构;①不能转录为信使RNA, 不能 编码蛋白质。;;真核细胞 基因结构;;1、目基因获取;一、目基因获取;1、从基因文库中获取目基因;;;①基因组文库构建;② cDNA文库构建-----反转录法: 以目基因转录成信使RNA为模板, 反转录成互补单链DNA, 然后在酶作用下合成双链DNA, 从而取得所需基因。;;（3）构建基因文库目;依据: 目基因相关信息。 如: 依据基因核苷酸序列 基因功效 基因在染色体上位置 基因转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特征;① 概念: PCR全称为_______________, 是一项 在生物____复制___________核酸合成技术 ;⑥过程: ;⑥过程: ;PCR反应体系中目基因成指数(2n)形式扩增;;蛋白质氨基酸序列;1.作用: ;二、基因表示载体构建——关键;寻根问底: ;资 料:;①载体与表示载体区分: 二者都有标识基因和复制原点两部分DNA???段。表示载体在载体基础上增加了目基因、开启子、终止子三部分结构 ②用到工具酶: 既用到限制酶切割载体, 又用到DNA连接酶将目基因和载体拼接, 两种酶作用化学键都是磷酸二酯键 ③开启子、终止子对于目基因表示必不可少 ④目基因不能单独进入受体细胞, 必需以表示载体方法携带进去。;2.下列属于获取目基因方法是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥;3. 在基因工程中, 把选出一个目基因（共1000个脱氧核苷酸对, 其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4次, 那么, 在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸个数是（ ）个; 4.目基因与运载体结合所需条件有 ①同一个限制酶 ②含有抗性基因质粒 ③RNA聚合酶 ④目基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP A．①②③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑥⑦ C．①②③④⑤ D．①②④⑤⑦;常见受体细胞: ;①特点: ;Hin d限制性酶ⅠⅡ;基因枪法: ;适适用于 单子叶植物;花粉管通道法: ;胚珠;花粉管通道法;①细胞类型: ;③常使用方法: ;（3）.将目基因导入微生物细胞;四 目基因检测与判定;1.检测;DNA分子杂交原理: 互补DNA单链能够在一定条件下结合成双链, 即能够进行杂交。这种结合是特异, 即严格根据碱基互补配对进行。所以, 当用探针和转基因生物DNA杂交时, 假如出现杂交带（用特殊显影装置能够看见）, 则说明目基因已插入受体细胞染色体DNA中。; ;变性;提取;例: 用棉铃饲喂棉铃虫, 如虫吃后不出现中毒症状, 说明未摄入目基因或摄入目基因未表示。如虫吃后中毒死亡, 则说明摄入了抗虫基因并得到表示。; 不能, 受体细胞必需表现出特定性状, 才能说明目基因完成了表示。;细菌检测, 将每个受体细胞单独培养形成菌落, 检测菌落中是否有目基因表示产物。淘汰无表示产物菌落, 保留有表示产物深入培养、研究。;基因工程基础操作程序;;