灵芝多糖和多肽抗氧化能力研究.docVIP

PAGE PAGE 20 灵芝多糖和多肽抗氧化能力研究 Study on antioxidant capacity of polysaccharides and polypeptides form Ganoderma lucidum 摘要 ：本实验采用DPPH体系、氮蓝四唑（NBT）光化还原法以及抗坏血酸——体系法对不同条件下提取的灵芝中多肽和多糖清除DPPH、和·OH自由基的能力测定。结果表明,用碱性蛋白酶酶解灵芝所得到的多糖溶液的清除效果比超声法提取的灵芝多糖溶液的清除效果好，而用超声法提取的灵芝多肽溶液的清除效果比用碱性蛋白酶酶解灵芝所得到的多肽溶液的清除效果好。综合三种酶解法对DPPH、·自由基、?OH的清除效果，碱性蛋白酶酶解灵芝的清除效果最好，纤维素酶次之，木瓜蛋白酶相对最差。 关键词：灵芝提取液；清除；DPPH；超氧自由基；羟基自由基； Abstract Effects of removing the DPPH/ the superoxide radical and hydroxyl radical with polysaccharides and polypeptides from Ganoderma Lucidum, extracted under different conditions,were determined by the method of the system of DPPH ,NBT photoreduction, system of ascorbic acid-Cu 2+ -H 2 O 2 . The results showed that the removing effects of Enzymatic Ganoderma lucidum polysaccharides by Alkaline Protease is better than the removing effects of Enzymatic Ganoderma lucidum polysaccharides by ultrasonic, the removing effects of Enzymatic Ganoderma lucidum polysaccharides by ultrasonic is better than t the removing effects of Enzymatic Ganoderma lucidum polysaccharides by Alkaline Protease. Effects of removing the DPPH/ the superoxide radical and hydroxyl radical with polysaccharides and polypeptides, Alkaline Protease’S is best, Cellulose’s is followed , Papain ‘s isrelative Worst. 1引言 1.1研究的背景和意义 自由基又叫游离基，它是由单质或化合物的均裂（HomdyticFission）而产生的带有未成对电子的原子或基团。它的单电子有强烈的配对倾向，倾向于以各种方式与其他原子基团结合，形成更稳定的结构，因而自由基非常活泼，成为许多反应的活性中间体。自由基是机体在氧化反应中不可避免而产生的“副产物”。自由基具有高度活性，可以直接或者间接地发挥着强氧化的作用，在人体中可能会攻击其他处于稳定结构的分子，易引起连锁反应。自由基可与生物体内的许多物质如脂肪酸、蛋白质等作用，夺取它们的氢原子，造成相关细胞的结构与功能的破坏，更重要的是其氧化产物和中间产物会伤害生物膜、酶、维生素、蛋白质及活细胞功能，其中一些还被人物是致癌物质. 超氧阴离子自由基（·）：超氧阴离子自由基是生物体内最主要的自由基。用EPR仪可以得到·的电子顺磁共振波谱。生物体内无论是在非酶反应或酶反应中都可以通过接收电子的方式氧化生成·，而·又可诱导体内超氧化物歧化酶（SOD）使·及时得到清除。 羟自由基（?OH）：羟自由基（?OH）化学性质极为活泼，可与多种有机物或无机物反应，反应速度快。在水中寿命极短。采用自旋捕捉法可以间接检测出?OH的存在。在体内有些羟化类药物，醌型抗肿瘤药物及某些生物酶如：黄嘌吟氧化酶、前列腺素合成酶等可以产生?OH，一些物理因素如电离辐射光照等也可产生?OH。加铁离子结合剂如：脱铁酶可以减轻或消除?OH。 DPPH法于1958年被提出，广泛用于定量测定生物试样和食品的抗氧化能力。此法是根据DPPH自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，