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刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究 1 1 材料与方法 2 2 结 果 3 3 讨 论 4 文2：食管癌基因表达谱及其与细胞分化的相关性研究 5 1材料和方法 6 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究 文1：刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究 动脉粥样硬化(AS)所致心脑血管病变是威胁人类健康的首位疾病，雌激素对心脑血管的保护作用受到国内外学术界的关注。绝经后妇女应用激素替代疗法(HRT)能显著降低心脑血管疾病的发病率。然而，HRT所带来的不良后果如乳腺癌、子宫内膜癌〔1〕、静脉血栓〔2，3〕等，在一定程度上限制其推广应用并促使人们转而寻求更加安全有效的雌激素替代品。植物雌激素是一类和雌二醇结构相似，具有弱雌激素样作用的非甾体样的植物成分，主要包含异黄酮、木酚素和香豆雌酚。红车轴草中含有鹰嘴豆芽素A、刺芒柄花素、染料木素和大豆黄素等多种异黄酮类植物雌激素〔4〕，刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A及其甙类占红车轴草总异黄酮的80%以上。本研究首次以刺芒柄花素灌胃去势后高脂食饵喂食的大鼠，初步观察提纯的刺芒柄花素在体内是否具有雌激素样效应，以及对大鼠血清脂质水平的影响。 1 材料与方法 主要药品、试剂及仪器 刺芒柄花素制备 红车轴草经乙醇热回流提取，水解处理，活性氧化铝吸附后酸性醋酸乙酯洗脱，再经硅胶柱层析分离，高效液相色谱分析刺芒柄花素含量为82%;尼尔雌醇：上海医药(集团)有限公司华联制药厂(批号060501) 其他试剂与仪器 丙硫氧嘧啶：上海复星朝晖药业有限公司(批号060901);胆固醇、胆盐：武汉亚法生物技术有限公司;蛋黄粉：浙江长兴艾格生物制品有限公司;猪油：武汉中百连锁仓储超市有限公司;AU400全自动生化分析仪：日本OLYMPUS公司。 实验动物 健康成年雌性SD大鼠40只，体重在150～200 g之间，购于武汉大学实验动物中心,合格证号：SCXK(鄂)20032005。 实验方法 造模及分组 采取随机方法将大鼠分为5组，每组8只。第1组为假手术组，打开腹腔切除卵巢周围小块儿脂肪后关腹。后4组采取经背双侧卵巢切除术。术后第5～10天连续进行阴道冲洗细胞涂片，确定假手术组有正常动情周期变化而后4组无变化则为造模成功。第11天起，各组饲以高脂饮食(含猪油10%，蛋黄粉5%，胆固醇%，胆盐%，丙硫氧嘧啶%)。与此同时，假手术组及模型组每日灌胃生理盐水1 ml/100 g，尼尔雌醇组每周一灌胃尼尔雌醇 mg/kg，刺芒柄花素低剂量及高剂量组每日分别灌胃刺芒柄花素20、100 mg·kg-1·d-1，连续8 w。 取材 第8周周一开始行阴道冲洗脱离细胞涂片，第8周末断头处死大鼠，取血 ml，待其 自然 凝固后采用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量。同时立即取出子宫并剥离周围结缔组织，称重后将标本置于10%甲醛中固定，石蜡包埋切片后进行HE染色，光镜下观察子宫内膜上皮变化。 统计学分析 数据以x±s表示，采用统计软件，用单因素方差分析进行多组均数比较，再用最小有意义差异法(LSD法)进行两两比较。 2 结 果 大鼠阴道细胞涂片 假手术组和尼尔雌醇组呈现正常的动情周期变化，可见动情期大量无核角化上皮细胞;模型组及刺芒柄花素低剂量组无动情周期变化，表现为动情间期的大量白细胞。刺芒柄花素高剂量组亦可见动情期变化，镜下见无核角化上皮，且互相融合。见图1。 各组子宫系数比较 按照公式子宫系数=子宫重量/体重(g/kg)各组大鼠子宫指数的均值比较中，假手术组最高，尼尔雌醇组和刺芒柄花素高剂量组其次，刺芒柄花素低剂量组和模型组最低。模型组与假手术组子宫指数比较，差异有统计学意义(P);尼尔雌醇组子宫指数较模型组明显升高(P)，与假手术组差异无统计学意义(P);低剂量刺芒柄花素使子宫指数有所提高，但与模型组比较，差异无统计学意义(P);高剂量刺芒柄花素可提高去势大鼠的子宫指数(P)，但该作用弱于尼尔雌醇组(P)。见表1。表1 各组子宫指数比较与假手术组比较：1)P;与模型组比较：2)P;与尼尔雌醇组比较：3)P 对子宫内膜的影响 假手术组子宫内膜上皮呈柱状，细胞核位于基底部。模型组子宫内膜上皮细胞萎缩呈扁平状。尼尔雌醇组内膜增生形成假复层，内膜上皮细胞呈高柱状，核浆比例增大，可见大量核下空泡，腺体上皮增生，亦可见核下空泡。刺芒柄花素低剂量组内膜上皮较模型组无明显差异，高剂量组的增