衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用.docVIP

衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用 1 1 材料与方法 3 2 结 果 4 3 讨 论 5 文2：不同浓度山茱萸多糖对HDF细胞衰老的影响 6 1 材料与方法 6 2 结 果 8 3 讨 论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用 文1：衰老HDF细胞DNA损伤与HSP70mRNA表达及山茱萸多糖的作用 【Abstract】 Objective To investigate the antiaging effect of the serum with Fructus Corni polysaccharides (FCP) and the possible mechanism of heat shock protein70 on human diploid fibroblasts (HDF) aging cell. Methods Conventional culture was performed in the HDF cells, the serum of FCP and control blood serum were added to the experiment group from 45 generation. The cell changes were observed under microscope. The cell activity was detected by MTT method. The DNA damage was detected using single cell gel electrophoresis (SCGE). RTPCR method was used to examine the expression of HSP70mRNA. Results In aging group the cell activity was decreased (P) and the levels of DNA damage were increased (P), the expression of HSP70 mRNA were depressed (P). Compared with the aging group, the cell activity and the expression of HSP70 mRNA were increased (P), the levels of DNA damage were reduced in FCP group. Conclusio The possible mechanism of antiaging effect of the serum FCP is to regulate the expression of HSP70 mRNA , to reduce the DNA damage. 【Key words】 Fructus corni polyaccharides (FCP); Heat shock protein70(HSP70); DNA damage; Human diploid fibroblasts (HDF) 热休克蛋白(HSPs) 作为“分子伴侣”与细胞的许多重要生理过程相关,在维持细胞正常功能上起关键作用〔1〕，其中HSP70是最受关注、研究最深入的一种。近年研究发现，其与衰老关系密切,通过转染HSP70基因,能够延长果蝇、美丽线虫的寿命〔2，3〕。伴随着机体衰老，HSP70的表达也呈下降趋势〔4，5〕。 HSP70不仅是判断细胞生理状态和应激能力的指标,而且也可作为机体或细胞老化的一个重要因素。但衰老条件下HSP70在DNA损伤中的作用目前仍不十分清楚。 现代 药 理学 研究表明，山茱萸多糖(FCP)具有抗炎、抗病毒、抗氧化等多种药理活性〔6〕,已成为临床上最常用的名贵中草药之一，深入研究其有效成分，综合开发利用山茱萸，具有重要的社会效益和 经济 价值。本实验通过检测FCP血清对HDF细胞HSP70 基因表达诱导作用的调控及DNA损伤情况,进一步探讨FCP抗衰老作用机制及HSP70在DNA损伤的作用，以明确HSP70与衰老的DNA损伤之间的关系。 1 材料与方法 药物与试剂 HDF细胞系南京凯基生物公司提供，小牛血清、胰蛋白酶、MTT粉、DMSO由北京华美公司提供。DMEM