2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响临床医学.docVIP

2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响临床医学 1 1 对象与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 5 文2：胎盘多肽注射液对人脐静脉内皮细胞增殖的影响临床医学 6 1 材料与方法 6 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 11 正文 2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响临床医学 文1：2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响临床医学 【Abstract】 Objective To explore the mechanisms of ECV304 incubated by the serum of patients associated with diabetes. Methods ECV304 were obtained by cultured conventionally and divided into N (control), H (cultured with the serum of healthy peon) and MD (cultured with the serum of diabetes patients) groups. Model cells′ intracellular free calcium (〔Ca2+〕i) and cytoskeleton were assayed by laser scanning confocal microscope(LSCM). Results ①There was a significant difference (P) regarding the intracellular calcium concentration(〔Ca2+〕i) of ECV304 between MD and H, N groups.② By the cytoskeleton, MD group was significantly different with the Group N. Conclusio The serum of diabetes patients could injury ECV304 and cause model cells’ intracellular free calcium (〔Ca2+〕i) and cytoskeleton change. 【Key words】 Type 2 diabetes mellitus;Vascular endothelial cell;Cytoskeleton;Intracellular free calcium 血管内皮细胞的完整性对于维持血管的正常功能有着重要的意义，维持细胞正常的形态和完整性必须依赖细胞中存在的细胞骨架〔1〕，而细胞骨架的分布变化又受到钙离子的调节。以往研究已经观察到利用患者血清可以造成血管内皮细胞损伤〔2〕，但其机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨糖尿病患者血清干预ECV304后对于内皮细胞骨架结构的影响以及同细胞内钙离子浓度变化的关系，进一步阐明其致血管内皮细胞损伤的作用机制。 1 对象与方法 对象 门诊及住院确诊的2型糖尿病患者40例，诊断均符合WHO(1999)和ADA(2005)2型糖尿病诊断标准。男21例，女19例，平均年龄(±)岁。平均随机血糖(±)mmol/L，空腹血糖(±)mmol/L，OGTT 2h血糖(±)mmol/L。随机选取健康志愿者30例作为正常对照组，男18例，女12例，平均年龄(±)岁。平均随机血糖(±)mmol/L，空腹血糖(±)mmol/L。 试剂与仪器 Fluo3/AM和F127购自美国BioRad公司，罗丹明标记的鬼笔环肽(Rhodamine phalloidin)购自美国Invitiogen 公司，TritonX100和山羊血清封闭液(BSA)购自美国GIBCO公司，Hoechst购自华美生物工程公司。Phtri皿(美国Corning公司)，激光共聚焦显微镜(510 META DUO SCAN，德国CARL ZEISS 公司)。人脐静脉内皮细胞株(ECV304)由武汉大学 中国 典型培养物保藏中心提供。 方法 血清制备 空腹取血，自凝后4℃，2 000 min，离心15 min。取上清液置无菌EP管中，56℃灭活30 min，-20℃冻存，备用。 细胞内游离钙浓度变化的观察 按照1×105/ml将细胞种植在Petri