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文章如果有不当或者不妥的地方，请您联系我修改文章或者删除文章，文章来源于网络收集，如果有侵权的问题，请联系我沟通协调改正，非常感谢您！ DNA复制的酶学和拓扑学 参与DNA复制 物质: 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依靠DNA DNA聚合酶, 简写为 DNA-pol 模板(template): 解开成单链 DNA母链 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP能够依次聚合 其她 酶和蛋白质因子 (dNMP)n + dNTP → (dNMP)n+1 + PPi 一、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸间 聚合 全称: 依靠DNA DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称: DNA-pol 活性: 1. 5’?3’ 聚合活性 2. 核酸外切酶活性 核酸外切酶活性: 5′ A G C T T C A G G A T A ? 3′ | | | | | | | | | | | 3′ T C G A A G T C C T A G C G A C 5′ ? 3’?5’外切酶活性: 能识别错配 碱基对, 并将其水解 5’?3’外切酶活性: 能切除突变 DNA片段 （一）原核生物有3种DNA聚合酶 DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ DNA-pol Ⅰ DNA-pol Ⅱ DNA-pol Ⅲ 分子量（kD） 109 120 250 组成 单肽链 ？ 多亚基不对称二聚体 分子数/细胞 400 ？ 20 5’?3’核酸外切酶活性 有 无 无 基因突变后的致死性 可能 不可能 可能 原核生物 DNA聚合酶 ２个关键酶 1个?-复合物（?、?、??、?、?、? 6种亚基） 1对?-亚基（可滑动 DNA夹子） 全酶结构包含: DNA聚合酶Ⅲ全酶结构: ?亚基（130 000）关键功效是合成DNA ?亚基含有3??5?外切酶活性（复制保真性所必需）?亚基可增强其活性 ?亚基可能起组装作用 关键酶由?、?和?亚基组成: 两侧 β亚基发挥夹稳DNA模板链, 并使酶沿模板滑动 作用 2个?-亚基分别和1个关键酶相互作用, 其柔性连接区能够确保在复制叉1个全酶分子 2个关键酶能够相对独立运动, 分别负责合成前导链和后随链 功效: 有促进全酶组装至模板上及增强关键酶活性 作用 ?-复合物由6种亚基组成: ?、?、??、?、?、? 对复制中 错误进行校读, 对复制和修复中出现 空隙进行填补 功效: DNA-pol Ⅰ（109kD）: 323个氨基酸 小片段 5? ? ??核酸外切酶活性 大片段/Klenow 片段 604个氨基酸 DNA聚合酶活性 ?? ? 5? 核酸外切酶活性 N 端 C 端 木瓜蛋白酶 DNA-pol Ⅰ Klenow片段是试验室合成DNA, 进行分子生物学研究中常见 工具酶 DNA-pol Ⅱ（120kD）: DNA-pol II基因发生突变, 细菌仍然能存活 DNA-pol Ⅱ对模板 特异性不高, 即使在已发生损伤 DNA模板上, 它也能催化核苷酸聚合。所以认为, 它参与DNA损伤 应急状态修复 （一）常见 真核细胞DNA聚合酶有5种 DNA-pol ? 起始引发, 有引物酶活性 DNA-pol ? 参与低保真度 复制 DNA-pol ? 在线粒体DNA复制中起催化作用 DNA-pol ? 合成后随链 DNA-pol ? 合成前导链 文章如果有不当或者不妥的地方，请您联系我修改文章或者删除文章，文章来源于网络收集，如果有侵权的问题，请联系我沟通协调改正，非常感谢您！